[发明专利]网织红细胞检测染料、检测试剂、检测试剂的制备方法、样本分析仪检测方法及样本分析仪

说明书

本发明提供一种网织红细胞检测染料、检测试剂、检测试剂的制备方法、样本分析仪检测方法及样本分析仪，提供的核酸染料可用于血液分析仪，以满足对网织红细胞计数准确和快速的检测要求。网织红细胞计数通过试剂处理，增加特异性的网织红细胞核酸染料以及网织红细胞细胞膜的处理试剂，采用核酸荧光染色及半导体激光流式细胞术在RET通道这单一通道中即可准确计数网织红细胞。即通过稀释液处理网织红细胞形态，将其球形化的同时，改变各类型细胞膜形态，便于网织红细胞的核酸与染料特异性地结合，从而实现网织红细胞的计数。

技术领域

本发明涉及血细胞分析技术领域，特别涉及一种网织红细胞检测染料、检测试剂、检测试剂的制备方法、样本分析仪检测方法及样本分析仪试剂。

背景技术

网织红细胞计数(尤其是网织红细胞绝对值)是反映骨髓造血功能的重要指标。目前检测方法主要有手工法和流式细胞法。

手工法：用煌焦油蓝等活体染色方法显示红细胞内网状结构，并在显微镜下计数1000个红细胞中所占的网织红细胞数，以百分比或分数表示。这种方法虽然取血量少但是染色时混合血液中的水分容易蒸发，造成染色时间偏短，结果偏低且受主观因素影响较多，耗时费力。

流式细胞法：用荧光染料使含RNA的网织红细胞着色，用流式细胞仪（FCM）计数并计算出网织红细胞的百分比。流式细胞仪溶液管路设计复杂，成本高，需要重复使用，易造成样本之间交叉污染。常用的荧光染料噻唑橙，该染料常温需孵育30-60分钟，且需要机外人对样本进行预处理。因此无法满足自动化测试要求。

血液分析仪，采用流式细胞法也可对Ret作分类计数，并提供与网织红细胞相关的多个参数。因此需要开发新的核酸染料用于血液分析仪，以满足对网织红细胞计数准确和快速的检测要求。

发明内容

本发明的范围只由后附权利要求书所规定，在任何程度上都不受这一节发明内容的陈述所限。

本发明的目的就是针对现有技术的上述问题，提供一种可用于样本分析仪，以满足对网织红细胞计数准确和快速的检测要求的网织红细胞检测染料、检测试剂、检测试剂的制备方法、样本分析仪检测方法及样本分析仪试剂。

为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

本发明公开了一种网织红细胞检测染料，包括荧光染料和醇，所述荧光染料为聚次甲基染料，其结构通式如下式I所示，

式I：

其中，Y^-为PF₆^-、HSO₃^-、X^-（X为卤素）、BF₄^-或CF₃SO₃^-；Z为、或；R1、R2和R3为不小于2个碳的烷基、酯基或醚基，R4为不小于2个碳的烷基。

所述醇为异丙醇和乙二醇中的至少一种。

所述R1为CH₃CH₂-或CH₃CH₂CH₂-。

所述R2为CH₃COOCH₂CH₂CH₂-。

所述R3为C₆H₅OCH₂-、C₆HSOCH₂CH₂-或CH₃OCH₂CH₂-。

优选地，所述荧光染料具有如下式II或式III所示的结构，