[发明专利]戊二酸尿症1型检测装置、尿液有机酸含量检测方法及其应用

说明书

本发明实施例提供了戊二酸尿症1型检测装置、尿液有机酸含量检测方法及其应用。其检测方法包括：建立待检测有机酸的标准曲线，所述待检测有机酸包括：戊二酸、3‑羟基戊二酸以及戊烯二酸；确定所述待检测有机酸的特征离子；去除尿液样品中的尿素；对所述尿液样品进行肟化反应；在所述肟化反应后，萃取所述尿液样品中的有机酸；使用氮气吹干萃取液，获得有机酸样本；对所述有机酸样本进行硅烷化反应；通过气相色谱‑质谱联用法，定量检测所述有机酸样本中待检测有机酸的含量；其中，质谱的扫描模式为“单离子检测”的特征离子扫描模式。其优化了检测的过程，有效的将检测时间缩短为20分钟并且能够排除数据误解读而造成的误判，具有良好的应用前景。

【技术领域】

本发明涉及体外检测技术领域，尤其涉及一种戊二酸尿症1型检测装置、尿液有机酸含量检测方法及其应用。

【背景技术】

戊二酸尿症1型(glutaricacidemiatypeⅠ，GA-Ⅰ)是一种常染色体隐性遗传有机酸尿症。其主要是由于细胞内戊二酰辅酶A脱氢酶(glutaryl-CoA dehydrogenase，GCDH)缺陷导致赖氨酸、羟赖氨酸及色氨酸代谢紊乱，造成体内大量戊二酸、3-羟基戊二酸、戊烯二酸堆积而致病。

其临床主要表现为大头畸形、进行性肌张力异常和运动障碍。在中枢神经系统尤为明显，可引起急性脑病危象。GA-1尿症的病理学显示纹状体损伤最为明显。

目前该病不可治愈，只能通过对症治疗来控制病情进展。患者需终身维持治疗，且药物副作用的发生率较高。其治疗方法是：根据诊疗指南多采用限制赖氨酸、色氨酸的摄入，补充核黄素、精氨酸、巴氯芬及谷氨酸受体拮抗剂等神经保护性药物。

其中，赖氨酸是一种人体必需氨基酸，用以帮助吸收钙并维持正常的激素，酶和抗体水平，长期缺少赖氨酸会使儿童出现生长停滞、反应淡漠、面色苍白、皮肤干燥、肌肉松弛、抵抗力降低等的问题，严重的还会影响智力发育。

巴氯芬具有较强的药物副作用，在药物用药过量的情况下表现为中枢神经抑制、嗜睡、意识混浊、呼吸抑制、昏迷及精神错乱、幻觉、调节紊乱、瞳孔反射消失，全身肌张力过低等。

鉴于药物副作用的发病率高，定期定量检测戊二酸尿症1型患者体内戊二酸、3-羟基戊二酸、戊烯二酸含量，对于确定临床用药量，降低药物副作用的发生率具有非常重要的意义。

目前，检测戊二酸尿症1型患者体内戊二酸、3-羟基戊二酸、戊烯二酸主要采用半定量的检测方法。

半定量检测方法得出的半定量检测结果是介于定性与定量之间的检测数据，其只能对检测物质定性无法准确计量待测物含量。而且，尿液有机酸检测采用气相色谱-质谱检测一个样本需要一个小时，检测通量低，检测成本高。

另外，现有的检测方法中采集的是患者尿液样本中所有化合物的质谱数据，导致数据解读难度提升，容易因数据解读造成假阳性。

【发明内容】

本发明实施例提供一种戊二酸尿症1型检测装置、尿液有机酸含量检测方法及其应用，旨在解决现有技术中戊二酸尿症1型患者体内贮积的化合物含量检测方法所存在的一个或多个缺陷。

为解决上述技术问题，本发明实施例提供以下技术方案：一种尿液有机酸含量检测方法。其中，该检测方法包括如下步骤：

建立待检测有机酸的标准曲线，所述待检测有机酸包括：戊二酸、3-羟基戊二酸以及戊烯二酸；

确定所述待检测有机酸的特征离子；

去除尿液样品中的尿素；

对所述尿液样品进行肟化反应；

在所述肟化反应后，萃取所述尿液样品中的有机酸；

使用氮气吹干萃取液，获得有机酸样本；

对所述有机酸样本进行硅烷化反应；