[发明专利]含（7aS,2’S）-2-氧-氯吡格雷的血浆样品的处理方法及测定方法

说明书

本发明公开了含(7aS,2’S)‑2‑氧‑氯吡格雷的血浆样品的处理方法及测定方法，属于药物分析技术领域，解决现有技术中尚未有针对(7aS,2’S)‑2‑氧‑氯吡格雷的血浆浓度测定方法的问题。本发明的含(7aS,2’S)‑2‑氧‑氯吡格雷的血浆样品的处理方法包括：取含(7aS,2’S)‑2‑氧‑氯吡格雷的全血，加入还原剂溶液，收集血浆，即得。本发明的血浆中(7aS,2’S)‑2‑氧‑氯吡格雷的测定方法采用上述处理方法处理待测样品，测定方法包括以下步骤：S1.全血处理：取全血，加入还原剂溶液，离心，收集血浆；S2.血浆样品预处理：向血浆中加入蛋白沉淀剂和内标工作液，涡旋后离心，并取上清；S3.LC/MS/MS测定。本发明方法简单，操作简便，具有良好的稳定性、专属性和灵敏度，测量结果准确。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种含(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷的血浆样品的处理方法及测定方法。。

背景技术

氯吡格雷(Clopidogrel)是一种噻吩并吡啶类衍生物，其本身为无活性的前体药物，需要在体内经过两步代谢生成有活性的硫醇衍生物(R-130964)。第一阶段：氯吡格雷由CYP1A2(约占36％)、CYP2B6(约占19％)、CYP2C19(约占45％)等代谢为无活性的2-氧-氯吡格雷；第二阶段：2-氧-氯吡格雷进一步代谢为有活性的硫醇衍生物(R-130964)。

因为氯吡格雷需要经历2步代谢过程才能生成活性物，起效缓慢。现有技术中提出了以其初级代谢产物(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷作为药物的方案。

(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷，化学名为：(S)-2-(2-氯苯基)-2-((S)-2-氧代-2,6,7,7a-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶-5(4H)基)乙酸甲酯，其结构式如下：

在现有技术中，尚未有针对(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷的血浆浓度的测定方法。因此，提供一种测定血浆中(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷的方法，专属性强，灵敏度高，稳定性好，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的之一在于，提供一种含(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷的血浆样品的处理方法，方法简单，操作简便，稳定性好。

本发明的目的之二在于，提供一种血浆中(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷的测定方法，采用上述处理方法处理待测样品。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供的一种含(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷的血浆样品的处理方法，该处理方法包括：取含(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷的全血，加入还原剂，收集血浆，即得。

本发明的部分实施方案中，所述还原剂为蛋白还原剂；优选地，所述蛋白还原剂包括二硫苏糖醇、三(2-羧乙基)膦、2-巯基乙醇中的至少一种；更优选为三(2-羧乙基)膦；

优选地，加入还原剂溶液，所述还原剂溶液的浓度50～500mg/ml；

优选地，血浆中还原剂的浓度为10～100mg/ml。

本发明意外地发现，通过加入蛋白还原剂，能有效提高(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷在血浆中的稳定性。

本发明的部分实施方案中，采用市售采血管抽取全血时，因采血管中已含抗凝剂，所述全血即经抗凝处理后，再加入还原剂溶液。

本发明提供的一种血浆中(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷的测定方法，该测定方法采用上述的处理方法处理待测样品。

本发明的部分实施方案中，采用LC/MS/MS测定血浆中(7aS,2’S)-2-氧-氯吡格雷，所述测定方法包括以下步骤：