[发明专利]视网膜色素上皮细胞诱导培养基及其应用

权利要求书

1.视网膜色素上皮细胞诱导培养基，其特征在于，为包含如下成分的Neurobasal培养基：

B27补充剂、L-谷氨酰胺 2 mM ~ 4 mM、丙酮酸钠 1 mM ~ 2 mM、β-巯基乙醇0.05 mM ~0.15 mM、L-抗坏血酸50 μM ~ 100 μM、cAMP 1 mM ~ 2 mM、BMP抑制剂50 nM ~100 nM、GSK-3β抑制剂 10 μM ~ 15 μM、ALK抑制剂10 μM ~ 20 μM以及SHH20 ng/ml ~ 50ng/ml；

其中，所述B27补充剂的添加量为所述Neurobasal培养基体积的1/60~1/40；所述BMP抑制剂为LDN193189；所述GSK-3β抑制剂为CHIR 99021；所述ALK抑制剂为SB431542。

2.视网膜色素上皮细胞培养方法，其特征在于，将视网膜色素上皮接种于权利要求1所述的诱导培养基中进行培养。

3.根据权利要求2所述的视网膜色素上皮细胞培养方法，其特征在于，培养时间大于等于7天。

4.根据权利要求2所述的视网膜色素上皮细胞培养方法，其特征在于，细胞在培养第2~4天后传代一次。

5.权利要求1所述的诱导培养基，或权利要求2~4任一项所述的方法在制备多巴胺能神经元样细胞中的应用。