[发明专利]一种人乳头瘤病毒HPV16型E7活性蛋白的制备方法及应用在审
| 申请号： | 202110957482.X | 申请日： | 2021-08-18 |
| 公开（公告）号： | CN113637690A | 公开（公告）日： | 2021-11-12 |
| 发明（设计）人： | 于倩;易汪雪;蔡赢;徐娅;王营;柯红;殷婷子;张振 | 申请（专利权）人： | 武汉华美生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/37 | 分类号： | C12N15/37;C07K14/025;C12N15/11;C12N15/70;C12N1/21;A61K39/12;A61P31/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人： | 徐小洋 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖开发区高新*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乳头 病毒 hpv16 e7 活性 蛋白 制备 方法 应用 | ||
1.一种密码子优化的HPV16型E7蛋白编码基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的编码基因，其特征在于，所述编码基因编码的HPV16型E7蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示。
3.一种用于扩增如权利要求1所述的密码子优化的HPV16型E7蛋白编码基因的引物，其特征在于，所述引物的序列如序列表SEQ ID NO.4-5所示。
4.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包含如权利要求1所述的密码子优化的HPV16型E7蛋白编码基因。
5.根据权利要求4所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体选自PET载体或毕赤酵母表达载体。
6.一种细胞，其特征在于，所述细胞中包含如权利要求4或5所述的表达载体。
7.根据权利要求6所述的细胞，其特征在于，所述细胞选自大肠杆菌、酵母或真核细胞。
8.一种人乳头瘤病毒HPV16型E7活性蛋白的制备方法，其特征在于，所述方法包括：将如SEQ ID NO.1所示的编码基因与表达载体连接并转入受体细胞，诱导目的蛋白表达后裂解细胞，收集纯化得到所述人乳头瘤病毒HPV16型E7活性蛋白。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述方法还包括：将如SEQ ID NO.1所示的编码基因与表达载体连接并转入受体细胞后，将受体细胞接种至发酵培养基中进行发酵，当OD600值增至12-15时结束发酵，再诱导目的蛋白表达。
10.如权利要求8中所述的人乳头瘤病毒HPV16型E7活性蛋白在制备抗人乳头瘤病毒的治疗性疫苗中的应用。
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