[发明专利]一种获得两种夏天无多糖的提取方法、两种夏天无多糖及其应用

权利要求书

1.一种获得两种夏天无多糖的提取方法，所述提取方法包括以下步骤：

将夏天无与水混合进行水提得到水提液，浓缩水提液得到浓缩液；

所述浓缩液为水提液的体积的1/25~1/35；

将无水乙醇和所述浓缩液混合，进行离心，取沉淀得到第一粗提物；所述无水乙醇和所述浓缩液的体积比为2:1；

将无水乙醇和所述离心的上清液混合，进行离心，取沉淀得到第二粗提物；所述无水乙醇和所述离心的上清液混合的体积比为（0.7~1）:1；

将胰蛋白酶和所述第一粗提物混合，进行酶解，得到酶解液，使用装有DEAE-SepharoseCL-6B凝胶的层析柱对所述酶解液进行第一洗脱得到第一洗脱液，对所述第一洗脱液进行纯化得到夏天无多糖CPS1；

所述第一洗脱包括以下步骤：利用蒸馏水洗脱，不收集洗脱液，蒸馏水洗脱结束后，以0.25 mol/L~0.45 mol/L的NaCl水溶液进行线性梯度洗脱，得到第一洗脱液；

使用装有DEAE-Sepharose CL-6B凝胶的层析柱对所述第二粗提物进行第二洗脱得到第二洗脱液，对所述第二洗脱液进行纯化，得到夏天无多糖CPW2；

所述第二洗脱包括以下步骤：利用蒸馏水洗脱，得到第二洗脱液。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述水提时，夏天无与水的质量比为1:（10~100）。

3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述第一洗脱和第二洗脱时流速分别为0.8mL/min。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述胰蛋白酶与第一粗提物中蛋白质的质量比为1:（15~20）。

5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述酶解的温度为37℃，酶解的时间为20h。

6.一种根据权利要求1~5任一项所述提取方法提取获得的夏天无多糖CPS1，所述夏天无多糖CPS1为均一杂多糖，分子量为360kDa，由葡萄糖，半乳糖，甘露糖和阿拉伯糖组成；

所述葡萄糖，半乳糖，甘露糖和阿拉伯糖组成的摩尔比为4.9:2.0:1:1.9。

7.权利要求1~5所述的提取方法提取获得的两种夏天无多糖或权利要求6所述的夏天无多糖CPS1在制备抑制炎症因子表达的制剂中的应用；所述炎症因子包括TNF-α、IL-1β、IL-6和COX-2。