[发明专利]一种裸眼可视化检测探针检测黄曲霉素的方法有效
| 申请号: | 202110940614.8 | 申请日: | 2021-08-17 |
| 公开(公告)号: | CN113702367B | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
| 发明(设计)人: | 罗荧萍;鲁琴芮;刘悦 | 申请(专利权)人: | 川北医学院 |
| 主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N21/31 |
| 代理公司: | 深圳紫晴专利代理事务所(普通合伙) 44646 | 代理人: | 付钦伟 |
| 地址: | 637000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 裸眼 可视化 检测 探针 黄曲霉 方法 | ||
1.一种裸眼可视化检测探针检测黄曲霉素的方法,其特征在于:所述探针1的序列为GGGXGGGXXGGGXGGG,其中X为A、T、C三种碱基中的任意一个,探针1可更换为探针2A+探针2B的组合,所述探针2A的序列为:GGGXGGGX,所述探针2B的序列为:XGGGXGGG,其中X为A、T、C三种碱基中的任意一个;
包括以下步骤:
(1)配置溶液1:溶液1含有10-40mMHEPES缓冲溶液、0.5-1μM的探针1或探针2A加探针2B的组合、5-200mM的NaCl、5-200mM的KCl、0.05%-0.5%的Triton-X-100、0.5-5μM的Hemin;
(2)配置溶液2:溶液2含有不同浓度的0-100μM的AF;
(3)配置溶液3:溶液3含有10-40mM的HEPES缓冲溶液、0.5-5mM的H2O2、0.5-4mM的ABTS;
(4)检测:将13μL溶液2加入到27μL的溶液1后,再加入10μL溶液3进行反应,并利用酶标仪记录1-30min时溶液在418nm处的吸收值,用手机拍照记录每一分钟溶液颜色变化情况,溶液为无色或浅绿色,则体系中存在AF,当溶液为深绿色,则不存在AF。
2.根据权利要求1所述的一种裸眼可视化检测探针检测黄曲霉素的方法,其特征在于:所述步骤(1)和步骤(3)中的HEPES缓冲溶液的pH值为7.0。
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