[发明专利]一种针对VEGF和TGF-β的双功能蛋白及其应用

权利要求书

1.一种针对VEGF和TGF-β的双功能蛋白，其特征在于，包括能够与VEGF抗原特异性结合的抗VEGF单克隆抗体、连接肽linker和两条TGF-βRII胞外结构域多肽，所述抗VEGF单克隆抗体通过所述连接肽linker与两条所述TGF-βRII胞外结构域多肽连接；

所述抗VEGF单克隆抗体包括两条重链和两条轻链，两条所述TGF-βRII胞外结构域多肽通过所述连接肽linker与所述抗VEGF单克隆抗体的两条所述重链的C末端或N末端分别连接；

所述重链的氨基酸序列为SEQ ID NO:1，所述轻链的氨基酸序列为SEQ ID NO:2；所述TGF-βRII胞外结构域多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:3；

所述连接肽linker的通式为(GGGGS)_n；

其中，所述n为4。

2.如权利要求1所述的针对VEGF和TGF-β的双功能蛋白，其特征在于，所述双功能蛋白选自以下任意一种：

蛋白EB-1，其由两条所述TGF-βRII胞外结构域多肽通过所述连接肽linker与抗VEGF单克隆抗体的两条所述重链的C末端分别连接构成，所述蛋白EB-1的重链的氨基酸序列为SEQID NO:4，其轻链的氨基酸序列为SEQ ID NO:2；

蛋白EB-2，其由两条所述TGF-βRII胞外结构域多肽通过所述连接肽linker与抗VEGF单克隆抗体的两条所述重链的N末端分别连接构成，所述蛋白EB-2的重链的氨基酸序列为SEQID NO:5，其轻链的氨基酸序列为SEQ ID NO:2。

3.一种核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子编码权利要求1或2所述的针对VEGF和TGF-β的双功能蛋白。

4.一种重组DNA表达载体，其特征在于，所述重组DNA表达载体包含权利要求3所述的核苷酸分子。

5.一种转染如权利要求4所述的重组DNA表达载体的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包括原核、酵母或哺乳动物细胞。

6.权利要求1或2所述的针对VEGF和TGF-β的双功能蛋白在制备治疗肿瘤疾病或纤维化疾病药物中的应用；

所述肿瘤疾病选自结直肠癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肾癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、黑色素瘤或神经胶质瘤；

所述纤维化疾病包括肝纤维化和肺纤维化。

7.权利要求1或2所述的针对VEGF和TGF-β的双功能蛋白和免疫调节药物或抗炎症因子药物联合用于制备治疗肿瘤疾病药物中的应用；所述免疫调节药物选自抗PD-1单克隆抗体、抗PD-L1单克隆抗体、抗CTLA4单克隆抗体、抗4-1BB单克隆抗体、抗OX-40单克隆抗体、抗PD-L2单克隆抗体、抗LAG-3单克隆抗体、抗TIGIT单克隆抗体、抗GITR单克隆抗体、抗ICOS单克隆抗体、抗PVR单克隆抗体、抗PVRIG单克隆抗体、抗VISTA单克隆抗体或抗TIMS单克隆抗体；

所述抗炎症因子药物选自：抗TNFa单克隆抗体、抗IL-1β单克隆抗体或IL-1受体拮抗剂、抗IL-6R单克隆抗体、抗IL-8单克隆抗体、重组IL-15或IL-15激动剂。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述肿瘤疾病选自结直肠癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肾癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、黑色素瘤或神经胶质瘤。