[发明专利]高灵敏度的免疫检测方法及其应用

权利要求书

1.免疫检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

提供待测样本、捕获抗体和检测抗体，所述捕获抗体偶联于固态基质，所述检测抗体标记有核酸探针；

将所述待测样本、所述捕获抗体、所述检测抗体混合反应，使所述待测样本中的待检目标同时结合所述捕获抗体和所述检测抗体形成免疫复合物；

将所述免疫复合物与CRSIPR/Cas系统蛋白、报告核酸混合，封装形成液滴，所述CRSIPR/Cas系统蛋白识别剪切所述核酸探针，并诱导产生对所述报告核酸的非特异性剪切，根据所述报告核酸的非特异性剪切结果进行检测。

2.根据权利要求1所述的免疫检测方法，其特征在于，所述液滴的体积为(1～100)×10^-15L。

3.根据权利要求1所述的免疫检测方法，其特征在于，所述检测抗体偶联于微球，所述微球上标记有多个所述核酸探针。

4.根据权利要求1所述的免疫检测方法，其特征在于，所述固态基质为磁性粒子。

5.根据权利要求1所述的免疫检测方法，其特征在于，所述CRSIPR/Cas系统蛋白为Cas13a蛋白。

6.根据权利要求1至5任一项所述的免疫检测方法，其特征在于，所述液滴的封装方法包括以下步骤：

提供油相、所述免疫复合物与所述CRSIPR/Cas系统蛋白及所述报告核酸的混合液；

以所述油相为流动相，以所述混合液为分散相，在压力和/或剪切力的作用下封装形成油包水的所述液滴。

7.根据权利要求6所述的免疫检测方法，其特征在于，所述油相还包括表面活性剂。

8.免疫检测试剂盒，其特征在于，包括：

捕获抗体，所述捕获抗体偶联于固态基质，所述捕获抗体用于特异性结合待检目标；

检测抗体，所述检测抗体标记有核酸探针，所述检测抗体用于特异性结合所述待检目标，且所述捕获抗体与所述检测抗体针对所述待检目标的不同表位；

报告核酸；

CRSIPR/Cas系统蛋白，所述CRSIPR/Cas系统蛋白用于特异性识别切割所述核酸探针，并产生非特异性剪切特性切割所述报告核酸。

9.根据权利要求8所述的核酸检测试剂盒，其特征在于，还包括微流控芯片。

10.根据权利要求9所述的核酸检测试剂盒，其特征在于，所述微流控芯片包括液滴形成区，所述液滴形成区用于形成(1～100)×10^-15L体积的液滴。