[发明专利]载物脂质体的多靶点复合体及含其的载药平台与应用

说明书

本发明公开了一种载物脂质体的多靶点复合体及含其的载药平台与应用。所述载物脂质体的多靶点复合体包含：干扰素基因刺激因子(STING)激动剂、免疫检查点抑制剂、外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶(ENPP1)抑制剂和脂质体；所述免疫检查点抑制剂靶向至少两个不同的免疫检查点抗原表位；所述STING激动剂与所述ENPP1抑制剂的质量比为10:(2.5～10)，并且不为10:10；所述STING激动剂与所述免疫检查点抑制剂的质量比为10:(2.5～100)，并且不为10:100；具体见正文。本发明的载物脂质体的多靶点复合体共载STING激动剂、ENPP1抑制剂和免疫检查点抑制剂，提高了多靶点复合体的抗肿瘤活性，具备广阔的抗肿瘤药物设计的应用前景和较高的临床应用价值。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种载物脂质体的多靶点复合体及含其的载药平台与应用。

背景技术

肿瘤是一类严重危害人类生命健康的重大疾病。免疫治疗是近几年发展最为迅速的治疗肿瘤的手段，可称作肿瘤治疗的一场革命。免疫治疗利用人体自身的免疫功能，对肿瘤细胞进行攻击，控制肿瘤的发展及转移。但是，由于肿瘤在癌变之前难以被免疫监视系统发现，而在肿瘤发生发展中，免疫功能可能通过免疫检查点受到抑制，发生免疫逃逸。因此，利用自身免疫抗肿瘤的两个关键点是：(1)通过免疫通路激活剂/激动剂，增强天然免疫能力；(2)破坏免疫检查点对免疫细胞的抑制，防止免疫逃逸。肿瘤的免疫治疗包括免疫检查点抑制剂单克隆抗体药物、细胞免疫治疗等。

STING(干扰素基因刺激因子，stimulator of interferon genes)，也称作MITA、TMEM73、ERIS、NET23、MPYS等，是一种内质网(ER)受体蛋白，激活STING可以增强先天免疫系统抗肿瘤或抗感染的能力。在感染的哺乳动物细胞中微生物和病毒DNA能通过刺激干扰素分泌诱导内源强有力的免疫应答。先天免疫STING通路激动剂cGAMP在抗肿瘤方面的药效已被证实。通过免疫激活或加强先天免疫通路，激活树突状细胞等免疫细胞，进而诱导激活细胞毒性T细胞杀肿瘤细胞。

内质网受体蛋白(例如STING)对胞质DNA的免疫应答是必需的因素。研究表明，环化cGMP-AMP二核苷酸合成酶(cGAS)在结合DNA后的活化条件下，内源性地催化环二核苷酸cGAMP的合成。cGAMP作为第二信使通过STING刺激干扰素IFN-I的响应，介导TBK1和IRF-3的活化，进而启动I型干扰素IFN-β基因的转录。STING是内质网的跨膜蛋白，内质网上具有一种外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(Ectonucleotide pyrophosphatase/phos-phodiesterase1，ENPP1)的水解酶。ENPP1在还原状态下以单体形式存在，分子量为115kd；在非还原情况下以二聚体形式存在，分子量为230kd。ENPP1是跨膜蛋白，位于细胞膜或者内质网上，ENPP1可以分泌到胞外，以可溶性的N端裂解的单体形式存在。ENPP1不但可以水解天然核苷酸中的磷酸二酯键，还可以水解环二核苷酸cGAMP。将小鼠的ENPP1基因敲除，cGAMP的半衰期有很大的提高。cGAMP会通过某种特殊的方式离开病毒细胞或者癌细胞转移到其他的宿主细胞中，然后通过激活宿主细胞的STING来诱导I型干扰素的表达。cGAMP会被细胞外游离的ENPP1降解。因此，阻止STING激动剂cGAMP被ENPP1水解是保持免疫激动剂有效寿命和药效的必然选择，高效的ENPP1抑制剂对于提高肿瘤免疫治疗效果有着重要的作用。

纳米抗体(nanobody)是一种单域抗体，天然缺失重链恒定区1(CH1)和轻链，具有结构稳定、分子小、溶解性好、耐受各类不良环境、易于人源化等优点，但是不同的纳米抗体有其特异性，在药物中的应用大多仍在临床研究中。

作为一种药物载体，纳米脂质体在延长药物半衰期、增强药效、靶向定点给药等方面具有广阔的应用前景。但是，如何制备稳定性好、包封率高、易于逃过细胞保护屏障进入细胞的靶向脂质体仍然是一个挑战。为了进一步提高药物的精准靶向性和利用率，单克隆抗体等免疫靶向脂质体可以靶向免疫细胞和肿瘤微环境，但是，单克隆抗体有分子量大、制备成本昂贵且难于量产、免疫反应等问题，形成了严峻挑战。