[发明专利]载物脂质体的多靶点复合体及含其的载药平台与应用

权利要求书

1.一种载物脂质体的多靶点复合体，其特征在于，其包含：干扰素基因刺激因子(STING)激动剂、免疫检查点抑制剂、外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶(ENPP1)抑制剂和脂质体；其中，所述脂质体为具有同心脂质双层膜和亲水性内核的单室封闭囊泡，所述STING激动剂位于所述亲水性内核中，所述外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶抑制剂位于所述同心脂质双层膜的疏水夹层中，所述免疫检查点抑制剂与所述脂质体的外表面连接；

所述免疫检查点抑制剂靶向至少两个不同的免疫检查点抗原表位；

所述STING激动剂与所述ENPP1抑制剂的质量比为10:(2.5～10)，并且不为10:10；所述STING激动剂与所述免疫检查点抑制剂的质量比为10:(2.5～100)，并且不为10:100。

2.如权利要求1所述的多靶点复合体，其特征在于，所述STING激动剂与所述ENPP1抑制剂的质量比为10:(2.5～5)，所述STING激动剂与所述免疫检查点抑制剂的质量比为10:(5～80)，例如为10:50或10:10；和/或，所述STING激动剂为cGAS-STING-cGAMP-IRF3免疫通路的激动剂；和/或，所述免疫检查点抑制剂为抗免疫检查点的抗体或其抗原结合片段；

较佳地，和/或，所述激动剂选自环二核苷酸类、氨基苯并咪唑类、呫吨酮类和吖啶酮类、苯并塞吩类、苯并二茂类或其组合；和/或，所述免疫检查点选自PD-1/PD-L1、CD47、VEGF、PVRIG、TIGIT、NKG2A、LILRB4、LILRB2、LAG-3、OX40、CTLA-4、TIM-3、VISTA、ILDR2、KIR、MHCII、GITR和4-1BB中的一种或多种；和/或，所述免疫检查点抑制剂为抗免疫检查点的抗体；

更佳地，所述激动剂为环二核苷酸或环二核苷酸金属配合物，例如为环二核苷酸2’3’-cGAMP；和/或，所述免疫检查点选自PD-1/PD-L1和CD47；和/或，所述抗体为纳米抗体(VHH)。

3.如权利要求1所述的多靶点复合体，其特征在于，所述ENPP1抑制剂为4(3H)-喹唑啉酮衍生物；优选地为2-[(4-甲基-(噻唑并[4,5-B]吡啶)-2-硫代)甲基]-7-氟-喹唑啉-4(3H)-酮、2-[(5-甲氧基-(咪唑并[4,5-B]吡啶)-2-硫代)甲基]-7-氟-喹唑啉-4(3H)-酮或2-[(5-氯-(咪唑并[4,5-B]吡啶)-2-硫代)甲基]-7-甲酸甲酯-喹唑啉-4(3H)-酮；和/或，

所述脂质体包含下述原料：磷脂和胆固醇；所述磷脂选自氢化大豆卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰乙醇胺、1,2-二硬脂酰-SN-甘油-3-磷酰乙醇胺-N-马来酰亚胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2000-MAL)中的一种或多种；所述磷脂与胆固醇的质量比为(18～25):5；

较佳地，所述的磷脂与胆固醇的质量比为(19～21):5；例如为19:5、20:5或21:5。

4.如权利要求1所述的多靶点复合体，其特征在于，所述脂质体组合物还包含肿瘤靶向试剂；所述肿瘤靶向试剂通过化学键桥接于所述脂质体的表面；

较佳地，所述肿瘤靶向试剂为靶向肿瘤细胞特异性表达的受体的配体；

更佳地，所述肿瘤靶向试剂为叶酸。

5.如权利要求1～4任一项所述的多靶点复合体，其特征在于，所述多靶点复合体的制备包括以下步骤：

(1)将所述原料与所述ENPP1抑制剂通过薄膜水化法得到共载脂质体；

(2)将步骤(1)中获得的共载脂质体与所述STING激动剂进行第一阶段搅拌孵育后，加入所述免疫检查点抑制剂进行第二阶段搅拌孵育，即得；

所述第一阶段搅拌孵育的条件为：65～75℃，1.5～2.5h；例如70℃，2h；

所述第二阶段搅拌孵育的条件为：20～25℃，避光过夜。