[发明专利]一种酶法制备嘌呤霉素的方法有效
| 申请号： | 202110892243.0 | 申请日： | 2021-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN113584105B | 公开（公告）日： | 2023-10-20 |
| 发明（设计）人： | 赵弘;于铁妹;潘俊锋;刘建 | 申请（专利权）人： | 深圳瑞德林生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/40 | 分类号： | C12P19/40 |
| 代理公司： | 深圳市深佳知识产权代理事务所(普通合伙) 44285 | 代理人： | 夏欢 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区粤海街*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 法制 嘌呤霉素 方法 | ||
1.一种酶法制备嘌呤霉素的方法，其特征在于，包括如下步骤：
3-氨基-D-核糖在甲基硫核糖激酶与ATP作用下，生成β-氨基核糖-1-磷酸；
β-氨基核糖-1-磷酸和N,N-二甲基嘌呤在嘌呤核苷磷酸化酶作用下，生成3-氨基-N,N-二甲基腺苷；
3-氨基-N,N-二甲基腺苷和甲基酪氨酸在氨基酸连接酶与ATP作用下，生成嘌呤霉素。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述嘌呤核苷磷酸化酶为PNP-a和/或PNP-b。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述氨基酸连接酶为aaligase-1和/或aaligase-2。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述嘌呤核苷磷酸化酶为PNP-b，所述氨基酸连接酶为aaligase-1。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在ATP参与的反应体系中，还包括由醋酸激酶和乙酰磷酸构成的ATP循环体系。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法为多组分一锅法。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述多组分一锅法反应体系中，3-氨基-D-核糖、N,N-二甲基嘌呤、甲基酪氨酸、ATP、甲基硫核糖激酶、嘌呤核苷磷酸化酶、氨基酸连接酶的比例为(50～150)mM：(50～150)mM：(50～150)mM：(1～2)mM：(1000～1500)U：(800～1500)U：(800～1500)U；
或者，3-氨基-D-核糖、N,N-二甲基嘌呤、甲基酪氨酸、ATP、乙酰磷酸、甲基硫核糖激酶、嘌呤核苷磷酸化酶、氨基酸连接酶、醋酸激酶的比例为(50～150)mM：(50～150)mM：(50～150)mM：(1～2)mM：(100～300)mM：(1000～1500)U：(800～1500)U：(800～1500)U：(2000～4000)U。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述多组分一锅法反应体系中还包括激活剂和底物助溶剂；
所述激活剂为氯化镁，所述底物助溶剂为异丙醇。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述多组分一锅法反应体系中，3-氨基-D-核糖、N,N-二甲基嘌呤、甲基酪氨酸、ATP、激活剂、底物助溶剂、甲基硫核糖激酶、嘌呤核苷磷酸化酶、氨基酸连接酶的比例为(50～150)mM：(50～150)mM：(50～150)mM：(1～2)mM：(5～15)mM：(100～150)mL：(1000～1500)U：(800～1500)U：(800～1500)U；
或者，3-氨基-D-核糖、N,N-二甲基嘌呤、甲基酪氨酸、ATP、乙酰磷酸、激活剂、底物助溶剂、甲基硫核糖激酶、嘌呤核苷磷酸化酶、氨基酸连接酶、醋酸激酶的比例为(50～150)mM：(50～150)mM：(50～150)mM：(1～2)mM：(100～300)mM：(5～15)mM：(100～150)mL：(1000～1500)U：(800～1500)U：(800～1500)U：(2000～4000)U。
10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述多组分一锅法的反应条件为：pH 7.0～8.5，15～30℃搅拌2～10小时。
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