[发明专利]SLC12A5及其抑制剂的应用

说明书

本发明涉及生物医药工程技术领域，公开了SLC12A5及其抑制剂的应用。本发明通过特异性抑制剂从分子水平和蛋白水平对SLC12A5进行抑制，与对照相比，无论在体内还是在体外，通过抑制SLC12A5的表达和活性均可以显著的抑制肝癌细胞的增殖，从而提示了以SLC12A5为靶点可以提供一种制备治疗或改善肝癌的药物和治疗肝癌的新途径。

技术领域

本发明涉及生物医药工程技术领域，具体涉及SLC12A5及其抑制剂的应用。

背景技术

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC,简称肝癌)是一种恶性程度非常高的肿瘤，因其起病隐匿、进展迅速，病死率在全世界恶性肿瘤中居第二位。虽然手术切除、肿瘤血管栓塞和射频消融等治疗方式有效地提高了肝癌患者的生存率，但是多数患者终因肝癌侵袭进展，预后极差。从分子水平探索肝癌的发病机制，寻找影响其发生和进展的关键分子，评估其成为分子标记物和干预靶点的可能性，将为发现并鉴定新型治疗靶点，制定有效的治疗策略奠定理论基础。

溶质转运蛋白(Solute Carrier,SLC)超家族是一类重要的细胞膜蛋白家族，介导细胞与外界以及细胞内各类溶质的跨膜运输，参与了细胞间的能量传递、营养代谢、信号传导等重要的生理病理过程。SLC12A5是溶质转运蛋白家族的成员，是Na⁺/K⁺、Cl^-在细胞膜上的共转运蛋白，在健康的人体中多表达于大脑组织。SLC12A5存在两种亚型，由不同的启动子启动产生，研究发现，缺乏这两种亚型的小鼠会在出生后不久因为呼吸衰竭以及运动缺陷而死亡。SLC12A5在中枢神经系统神经元中高表达。很多神经系统疾病的研究表明，SLC12A5的异常表达与癫痫发作有关，也与应激障碍、慢性疼痛以及精神问题相关。近年来也有研究发现SLC12A5在膀胱移行细胞癌、结直肠癌和肺腺癌等肿瘤疾病中高表达。该基因能显著增强细胞增殖和促进G1－S期转化，抑制肿瘤细胞凋亡，但是其在其他癌症中的作用仍未有相关研究和报道。

目前国内外关于SLC12A5在神经系统之外的研究很少，特别是在肝脏中的研究寥寥无几。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供SLC12A5(Solute Carrier Family 12 Member5)作为治疗或改善肝癌的靶点中的应用，即任何形式的对其抑制、沉默、敲除、降低表达的方式或物质都可以应用于治疗或改善肝癌或其相关药物制备中；

本发明的另外一个目的在于提供SLC12A5抑制剂在制备治疗或改善肝癌的药物中的应用。

本发明应用SLC12A5的小分子特异性抑制剂VU0240551在体内和体外检测抑制肝癌细胞的增殖能力；VU0240551的CAS号：893990-34-6，分子式：C₁₆H₁₄N₄OS₂，分子量：342.44，是SLC12A5通道的抑制剂，结构式如下：

结果显示，VU 0240551作用于Huh7和HepG2细胞，克隆形成实验表明VU 0240551治疗对肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用，MTs检测发现VU 0240551能够有效抑制Huh7和HepG2细胞的增殖作用。

与体外结果一致，与对照肿瘤相比，VU 0240551治疗显著降低了裸鼠皮下移植瘤的生长。这些数据表明，SLC12A5的靶向抑制剂VU 0240551可以通过抑制SLC12A5的生物学功能起到抑制肝癌增殖能力的作用。