[发明专利]一种测定血浆中达格列净浓度的方法

权利要求书

1.一种测定血浆中达格列净浓度的方法，包括如下步骤：

(1)血浆样品预处理：取血浆样品，加入内标地西泮溶液，加入乙腈沉淀蛋白，高速离心，吸取上清液，加入去离子水，混匀后进样；

(2)将步骤(1)预处理后的血浆样品进行液相色谱分离：

色谱柱为AgilentZORBAXEclipseC8，4.6×100mm，3.5μm；

流动相：6mmoL/L醋酸铵水溶液和乙腈，两者体积比为50：50；柱温为35℃；流速为700μL·min^-1；进样量：50μL；

(3)质谱测定：

离子源：电喷雾离子化电离源ESI；离子检测方式：多反应监测；离子极性：负离子；离子源电压IS：-2500V；离子源温度TEM：700℃；碰撞气CAD：6L·min^-1；气帘气CUR：30L·min^-1；离子源Gas1：45L·min^-1；离子源Gas2：60L·min^-1；检测对象的离子选择通道：达格列净[M+CH3COO]^－，m/z 467.2/329.2，DP：-45，EP：-10，CE：-25，CXP：-7；内标地西泮[M－H]^－，m/z283.3/226.0，DP：-24，EP：-10，CE：-13，CXP：-5；

(4)计算：采用内标法，以达格列净和内标地西泮的峰面积比值代入标准曲线方程计算达格列净浓度。

2.根据权利要求1所述的测定血浆中达格列净浓度的方法，其特征在于，步骤(1)具体为：于1.5mL塑料离心管中精密加入受试者血浆样本200μL，精密加入内标200μg·mL^-1地西泮溶液50μL，旋涡10s，加入510μL乙腈沉淀蛋白，涡旋1min，于15000rpm、4℃离心10min；吸取400μL上清液至进样瓶中，加入200μL去离子水，涡旋混匀，进样测定。

3.根据权利要求1所述的测定血浆中达格列净浓度的方法，其特征在于，所述血浆为口服达格列净片或缓释片后的血浆。

4.根据权利要求1所述的测定血浆中达格列净浓度的方法，其特征在于，所述血浆为人或动物后的血浆。