[发明专利]一种检测捻转血矛线虫感染的复合抗原与其应用有效
| 申请号： | 202110881317.0 | 申请日： | 2021-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN113640524B | 公开（公告）日： | 2023-02-28 |
| 发明（设计）人： | 严若峰;李祥瑞;徐立新;宋小凯;赖旭东 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/53;C07K14/435;C07K16/18;C07K16/06;C12N15/12;C12N15/70 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 傅婷婷;徐冬涛 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 捻转血矛 线虫 感染 复合 抗原 与其 应用 | ||
1.捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C在制备捻转血矛线虫感染诊断试剂中的应用，所述的捻转血矛线虫Hc-5C的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C在制备捻转血矛线虫感染的分子生物学诊断或血清学诊断试剂盒中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C在制备捻转血矛线虫感染的胶体金试纸条的应用。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征在于，所述的捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C通过以下方法制备：提取捻转血矛线虫总RNA，反转录合成cDNA的第一条链，以该cDNA为模板，以SEQ ID NO. 2-11所示的引物进行RT-PCR扩增，PCR产物再经过重叠延伸PCR技术获得Hc-5C基因；将Hc-5C基因插入pET28a的
5.一种检测捻转血矛线虫感染的胶体金试纸条，其特征在于，包含用胶体金标记的捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C制备的金标垫，由捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C包被检测线（T）以及抗捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C的抗体包被质控线（C）的试纸条；所述的捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
6.根据权利要求5所述的胶体金试纸条，其特征在于，所述的捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C通过以下方法制备：提取捻转血矛线虫总RNA，反转录合成cDNA的第一条链，以该cDNA为模板，以SEQ ID NO. 2-11所示的引物进行RT-PCR扩增，PCR产物再经过重叠延伸PCR技术获得Hc-5C基因；将Hc-5C基因插入pET28a的
7.根据权利要求5所述的胶体金试纸条，其特征在于，所述的抗捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C的抗体为Hc-5C的多克隆抗体。
8.根据权利要求7所述的胶体金试纸条，其特征在于，所述的抗捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C的抗体通过以下方法获得：用纯化的捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C与弗氏完全佐剂乳化后免疫兔，与弗氏不完全佐剂乳化加强免疫3次；收集高免血清，纯化。
9.根据权利要求5所述的胶体金试纸条，其特征在于，所述的金标垫通过以下方法获得：用胶体金标记纯化的捻转血矛线虫复合抗原Hc-5C；金标垫浸泡、干燥；裁剪成合适大小；粘贴于试纸条底板上。
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