[发明专利]一种适用于血小板抗体检测的抗筛细胞、其制备方法及其应用

说明书

本发明属于血小板抗体检测技术领域，具体地说，涉及一种适用于血小板抗体检测的抗筛细胞、其制备方法及其应用。所述的抗筛细胞采用如下方法制备得到：1）将已筛选确认抗原谱的3人份O型血小板等体积混合，使用血小板清洗液清洗、离心，弃掉上清，保留血小板沉淀；2）使用血小板载入液将步骤1）的血小板沉淀重悬，调整细胞浓度到（1.0‑2.0）×10¹⁰个/ml，振荡；3）振荡后使用血小板清洗液再次清洗，清洗完成后使用血小板保存液重悬沉淀，调整细胞浓度到（2.0‑5.0）×10⁷个/ml，得到适用于血小板抗体检测的抗筛细胞。本方法制备的血小板抗筛细胞可以应用于血小板抗体检测，保存时间长，使用方便，抗原保存效果好。

技术领域

本发明属于血小板抗体检测技术领域，具体地说，涉及一种适用于血小板抗体检测的抗筛细胞、其制备方法及其应用。

背景技术

血小板抗体是机体对血小板表面或相关抗原免疫产生的，刺激血小板抗体产生的抗原可以是自身的也可以是异体的。血小板抗体有两类，一类主要是针对人类组织相容性抗原（HLA）I类抗原的抗体，即血小板表面相关抗体（PA IgG），一类是针对GP抗原的血小板特异性抗体(PB IgG)。GP抗原和HLA-I类抗原刺激机体产生同种免疫反应，导致的外源性血小板破坏使血小板寿命缩短和功能改变，是血小板输注无效的重要原因，而随着输注次数及量的增加，检出血小板抗体的阳性率增高，发生输注无效及非溶血性输血反应率也增高。

血小板抗原经输血、妊娠及骨髓移植等可刺激机体产生血小板抗体，抗体可致敏血小板并使其破坏，引起血小板减少，导致患者出现淤点、淤斑、出血甚至死亡等严重后果。检测患者血小板抗体可辅助临床采取恰当的预防和治疗措施，为血小板抗体阳性患者进行交叉配型以筛选血小板相容性患者，可显著减少血小板输注无效症的发生。

抗血小板抗体检测试剂盒为各大医院输血科、血站提供了一个简单、快捷的方法来检测患者血液中是否有抗血小板抗体，可辅助临床采取恰当的预防和治疗措施。为抗血小板抗体阳性患者进行交叉配型以筛选血小板相容性供者，从而预防血小板输注无效。目前国内外抗血小板抗体检测主要有免疫细胞化学法、微柱凝胶法及固相凝集法三种。免疫细胞化学法由于需要专用仪器、繁琐、耗时，不适于基层开展，微柱凝胶法容易造成结果误差，而固相凝集法因灵敏度、特异性高而前景较好。

准确、快速、简便的检测和鉴定出血小板抗体对血小板免疫性疾病的诊断、治疗等方面起着重要的作用。目前临床上血小板抗体检测的主要方法是以免疫学方法为主，但因为血小板表面抗原的复杂性和多样性，到目前为止没有商品化的纯抗原销售。在当前的检测中多使用血小板本身作为抗原。然而正常情况下血小板的保存期仅为5-7天，而血小板抗体的检测又依赖于血小板抗原，这就为血小板抗体的检测增加了难度。目前我国尚无商品化的抗筛细胞，以致临床难以开展血小板抗体检测，少数血站应用的国外试剂价格昂贵，检测成本高，增加了患者负担。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种适用于血小板抗体检测的抗筛细胞、其制备方法及其应用。本发明所提供的抗筛细胞可用于血小板抗体的检测，保存时间长，使用方便，抗原保存效果好。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种适用于血小板抗体检测的抗筛细胞，其中，所述的抗筛细胞采用如下方法制备得到：

1）将已筛选确认抗原谱的3人份O型血小板等体积混合，使用血小板清洗液清洗、离心，弃掉上清，保留血小板沉淀；

2）使用血小板载入液将步骤1）的血小板沉淀重悬，调整细胞浓度到（1.0-2.0）×10¹⁰个/ml，振荡；

3）振荡后使用血小板清洗液再次清洗，清洗完成后使用血小板保存液重悬沉淀，调整细胞浓度到（2.0-5.0）×10⁷个/ml，得到适用于血小板抗体检测的抗筛细胞。