[发明专利]一种适用于血小板抗体检测的抗筛细胞、其制备方法及其应用

权利要求书

1.一种适用于血小板抗体检测的抗筛细胞的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括如下步骤：

1）将已筛选确认抗原谱的3人份O型血小板等体积混合，使用血小板清洗液清洗、离心，弃掉上清，保留血小板沉淀；

2）使用血小板载入液将步骤1）的血小板沉淀重悬，调整细胞浓度到（1.0-2.0）×10¹⁰个/ml，振荡；

3）振荡后使用血小板清洗液再次清洗，清洗完成后使用血小板保存液重悬沉淀，调整细胞浓度到（2.0-5.0）×10⁷个/ml，得到适用于血小板抗体检测的抗筛细胞；

所述的血小板清洗液由如下成分组成：柠檬酸钠5-15mmol/L，氯化钠75-80mmol/L，氯化钾10-20mmol/L，磷酸二氢钠15-25mmol/L，乙酸钠10-20mmol/L，氯化镁10-20mmol/L，硫酸钾3-8mmol/L，牛血清白蛋白25-35g/L，蔗糖10-20g/L，海藻糖15-25g/L，葡萄糖15-25g/L，其pH为7.2-7.6；

所述的血小板载入液由如下成分组成：HEPES 40-60mmol/L，氯化钠75-80mmol/L，氯化钾10-20mmol/L，蔗糖15-25g/L,海藻糖15-25g/L，D-甘露醇10-20g/L，冰醋酸10-20mmol/L，戊二醛0.0020-0.0030%，其pH为6.5-6.8；

所述的血小板保存液由如下成分组成：HEPES 20-30mmol/L，氯化钠40-50mmol/L，氯化锌1-5mmol/L，氯化钙8-15mmol/L，乙酸钠8-15mmol/L，柠檬酸钠8-10mmol/L，碳酸氢钠20-30mmol/L，硫酸镁3-8mmol/L，海藻糖15-25g/L，葡萄糖10-20g/L，还原型谷胱甘肽5-15mg/L,对氨基苯甲酸10-20mg/L，核黄素1-5mg/L，肌醇1-5mg/L，谷氨酰胺20-30mg/L，维生素C3-8mg/L，木糖醇3-8g/L，牛磺酸15-25mg/L，硫酸新霉素115-125mg/L，氯霉素290-310mg/L，其pH为6.5-7.0。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

所述的血小板清洗液由如下成分组成：柠檬酸钠10mmol/L，氯化钠77mmol/L，氯化钾15mmol/L，磷酸二氢钠20mmol/L，乙酸钠15mmol/L，氯化镁15mmol/L，硫酸钾5.0mmol/L，牛血清白蛋白30g/L，蔗糖15g/L，海藻糖20g/L，葡萄糖20g/L，其pH7.4；

所述的血小板载入液由如下成分组成：HEPES 50mmol/L，氯化钠77mmol/L，氯化钾15mmol/L，蔗糖20g/L,海藻糖20g/L，D-甘露醇15g/L，冰醋酸15mmol/L，戊二醛0.0025%，其pH6.68；

所述的血小板保存液由如下成分组成：HEPES 25mmol/L，氯化钠45mmol/L，氯化锌3mmol/L，氯化钙12mmol/L，乙酸钠12mmol/L，柠檬酸钠9.4mmol/L，碳酸氢钠24mmol/L，硫酸镁5.6mmol/L，海藻糖20g/L，葡萄糖15g/L，还原型谷胱甘肽10mg/L,对氨基苯甲酸15mg/L，核黄素2mg/L，肌醇3.5mg/L，谷氨酰胺25mg/L，维生素C 5mg/L，木糖醇5g/L，牛磺酸20mg/L，硫酸新霉素120mg/L，氯霉素300mg/L，其pH6.86。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2）中，所述的振荡为在35-40℃下振荡1-3小时。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的振荡为在37℃下振荡2小时。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）中所述的清洗为清洗3遍；步骤3）中所述的清洗为清洗2遍。

6.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的血小板保存液中，所述的HEPES采用咪唑或磷酸盐缓冲液代替。