[发明专利]一种基于结合化合物的间充质干细胞分离的方法在审
| 申请号： | 202110877524.9 | 申请日： | 2021-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN113637634A | 公开（公告）日： | 2021-11-12 |
| 发明（设计）人： | 彭伟群;曹小伍;邵草品;方梓馨;李禅 | 申请（专利权）人： | 杭州憶盛医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 311215 浙江省杭州市滨江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 结合 化合物 间充质 干细胞 分离 方法 | ||
1.一种基于结合化合物的间充质干细胞分离的方法，其特征在于，包括：
(a)从癌细胞的器官样本制备细胞悬液后将其封装在包覆琼脂糖的培养基中；在培养基中实现细胞传代培养；
(b)使所述细胞培养基悬液与Lgr6型和/或Lgr5型结合化合物接触，然后使所述细胞与相应的抗癌化学治疗剂接触至一定时间；
(c)量取间充质干细胞上清液，经外泌体分离纯化后，从所述培养基悬液中取出存活细胞，鉴定所述细胞是否与结合化合物结合；
(d)将所述间充质干细胞与所述结合化合物分离。
2.根据权利要求1所述的间充质干细胞分离的方法，其特征在于，所述干细胞是胃干细胞、肝干细胞或肺干细胞中的一种。
3.根据权利要求1所述的间充质干细胞分离的方法，其特征在于，所述间充质干细胞是脂肪间充质干细胞(ADSCs)。
4.根据权利要求1所述的间充质干细胞分离的方法，其特征在于，所述步骤a中的培养基由DMEM/F12、缓冲液和少量霉素混合液配制。
5.根据权利要求1所述的间充质干细胞分离的方法，其特征在于，所述步骤b中的所述结合化合物为能够结合Lgr5型或Lgr6型的至少两种不同的抗体或抗体衍生物或抗体片段。
6.根据权利要求1所述的间充质干细胞分离的方法，其特征在于，所述步骤b中的所述抗癌化学治疗剂为丝裂霉素或紫杉醇。
7.根据权利要求1所述的间充质干细胞分离的方法，其特征在于，所述步骤c中，分离纯化步骤具体包括：量取200-260毫升间充质干细胞的细胞上清液，经离心去除细胞碎片等沉淀；用真空循环水泵在1bar的负压表压下，将离心后的上清液用0.2微米孔径的PES滤膜完全过滤。
8.根据权利要求1所述的间充质干细胞分离的方法，其特征在于，所述细胞是对于丝裂霉素有抗性的。
9.根据权利要求1所述的间充质干细胞分离的方法，其特征在于，所述癌细胞是哺乳动物细胞。
10.一种应用分离后的间充质干细胞的方法，其特征在于，间充质干细胞采用如权利要求1-9中任一项的方法制备，并且应用于胃癌、肝癌或肺癌中的一种。
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