[发明专利]一种泛素偶联修饰的嵌合抗原受体及免疫细胞

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体的改造方法，其特征在于，所述改造方法包括将泛素偶联至嵌合抗原受体的C端。

2.一种泛素修饰的嵌合抗原受体，其特征在于，所述泛素修饰的嵌合抗原受体包括跨膜域、胞内域和胞外域，所述胞内域C端偶联有泛素。

3.根据权利要求2所述的泛素修饰的嵌合抗原受体，其特征在于，还包括以下特征中的任一项或多项：

1)所述跨膜域选自CD8α、CD28或DAP 10；

2)所述胞内域包括共刺激结构域和/或信号结构域。

4.根据权利要求3所述的泛素修饰的嵌合抗原受体，其特征在于，所述胞内域选自以下中的一种或几种的组合：4-1BB、CD28、OX40、ICOS、CD3ζ或DAP 10。

5.根据权利要求2所述的泛素修饰的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体中依次包括CD8α信号肽、蛋白纯化标签、单链抗体、CD8α铰链组成的胞外域，CD8α跨膜域，CD28和CD3ζ串联组成的胞内域。

6.根据权利要求5所述的泛素修饰的嵌合抗原受体，其特征在于，单链抗体选自GD2scFv、GPC3 scFv、Her2 scFv、CSPG4 scFv、EGFR scFv、Meso scFv、TRBC1 scFv、CD133scFv、BCMA scFv或CD19 scFv。

7.根据权利要求2所述的泛素修饰的嵌合抗原受体，其特征在于，所述泛素选自野生型泛素或突变型泛素。

8.根据权利要求2所述的泛素修饰的嵌合抗原受体，其特征在于，所述泛素选自突变型泛素，所述突变型泛素的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示。

9.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述分离的多核苷酸包括编码权利要求2-8任一所述的泛素修饰的嵌合抗原受体的核苷酸。

10.一种核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体中包括权利要求9所述的多核苷酸。

11.一种免疫细胞，其特征在于，所述免疫细胞中包括权利要求10所述的核酸构建体或基因组中整合有外源的权利要求9所述的多核苷酸，或能够表达权利要求2-8任一所述的泛素修饰的嵌合抗原受体。

12.根据权利要求11所述的免疫细胞，其特征在于，所述免疫细胞选自CAR-T细胞、CAR-NK细胞、CAR-巨噬细胞或CAR-TIL细胞。

13.权利要求11-12任一所述的免疫细胞的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将权利要求10所述的核酸构建体或权利要求9所述的多核苷酸导入免疫效应细胞或产生免疫效应细胞的干细胞中。

14.根据权利要求13所述的制备方法，其特征在于，所述免疫效应细胞选自T细胞、NK细胞、巨噬细胞或TIL细胞。

15.权利要求11-12任一所述的免疫细胞在制备治疗癌症或免疫性疾病药物中的用途。

16.一种肿瘤或免疫性疾病的治疗方法，其特征在于，所述治疗方法包括向受试者施用治疗有效量的权利要求11-12任一所述免疫细胞。

17.根据权利要求16所述的治疗方法，其特征在于，所述癌症为非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肾细胞癌、结肠直肠癌、卵巢癌、乳癌、胰脏癌、胃癌、膀胱癌、食管癌、间皮瘤、黑色素瘤、头颈部癌、甲状腺癌、肉瘤、前列腺癌、成胶质细胞瘤、子宫颈癌、胸腺癌；白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、蕈样肉芽肿、默克尔细胞癌和其它恶性血液病、经典型霍奇金淋巴瘤、原发性纵隔大B细胞淋巴瘤、富于T细胞或组织细胞的大B细胞淋巴瘤、EBV阳性和阴性PTLD和EBV相关弥漫性大B细胞淋巴瘤、浆母细胞性淋巴瘤、结外NK/T细胞淋巴瘤、鼻咽癌或HHV8相关原发性渗出性淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤；所述免疫性疾病为系统性红斑狼疮、自身免疫性糖尿病、银屑病、白癜风、硬皮症、类风湿性关节炎。