[发明专利]一种基于通用探针检测牛奶中雌二醇的方法

权利要求书

1.一种制备通用探针QBs@SPA的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将QBs分散于PB缓冲液中，混合均匀；之后加入EDC活化剂孵育震荡；再加入SPA，继续孵育震荡，得到混合物；其中所述的QBs和EDC的质量比为35～45：1，所述的QBs和SPA的质量比为15～25：1；

(2)将BSA溶液加入步骤(1)的混合物中进行封闭，得到封闭后的混合物；

(3)将封闭后的混合物离心，得到通用探针QBs@SPA。

2.权利要求1所述的方法制备得到的通用探针QBs@SPA。

3.一种制备通用探针QBs@SPA@anti-IgG的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将权利要求2所述的通用探针QBs@SPA重悬于PB缓冲液，得到通用探针QBs@SPA悬浮液，之后和EDC混合均匀，再加入抗IgG抗体，孵育、离心，得到通用探针QBs@SPA@anti-IgG；其中通用探针QBs@SPA和抗IgG抗体的质量比为19～21：1。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的通用探针QBs@SPA和EDC的质量比为90～110：1。

5.权利要求3或4所述的方法制备得到的通用探针QBs@SPA@anti-IgG。

6.一种制备检测雌二醇的免疫层析试纸条的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将0.05～0.6mg/mL雌二醇完全抗原溶液喷涂到硝酸纤维素膜上作为检测线(T线)，喷涂速度为1μL/cm；将0.2mg/mLanti-IgG抗体溶液喷涂到硝酸纤维素膜上，作为质控线(C线)；T线、C线间距4～6mm，干燥，得到含有检测线、质控线的硝酸纤维素膜；之后将样品垫、含有检测线和质控线的硝酸纤维素膜、吸水纸依次粘贴在PVC底板上组装成试纸条。

7.权利要求6所述的方法制备得到的检测雌二醇的免疫层析试纸条。

8.一种基于权利要求2所述的通用探针QBs@SPA或权利要求5所述的通用探针QBs@SPA@anti-IgG检测牛奶中雌二醇的方法，包括如下步骤：

(1)将通用探针QBs@SPA或通用探针QBs@SPA@anti-IgG、雌二醇单抗和待测溶液进行混合，得到待测样品；其中通用探针QBs@SPA、雌二醇单抗和待测溶液的用量比为5μL：0.3μg：50μL；通用探针QBs@SPA@anti-IgG、雌二醇单抗和待测溶液的用量比为4μL：0.05μg：50μL；

(2)将待测样品滴在权利要求7所述的免疫层析试纸条的样品垫上；之后将免疫层析试纸条放在37℃孵育15min后，测试T线、C线的荧光值；

(3)将测试得到的T线、C线的荧光值代入标准曲线，得到待测溶液中雌二醇的浓度。

9.权利要求2所述的通用探针QBs@SPA、权利要求5所述的通用探针QBs@SPA@anti-IgG或权利要求7所述的免疫层析试纸条在食品检测领域中的应用。

10.权利要求8所述的方法在食品检测领域的应用。