[发明专利]一种木寡糖含量的分析方法在审
申请号: | 202110853940.5 | 申请日: | 2021-07-28 |
公开(公告)号: | CN113607667A | 公开(公告)日: | 2021-11-05 |
发明(设计)人: | 刘刚;田娟;吴帅帅;王娟;谢宁 | 申请(专利权)人: | 深圳大学 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N21/78 |
代理公司: | 深圳市德锦知识产权代理有限公司 44352 | 代理人: | 黄萍 |
地址: | 518000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 寡糖 含量 分析 方法 | ||
1.一种测定木寡糖含量的方法,所述方法包括以下步骤:
(1)取木寡糖标准品,制定木寡糖浓度的标准曲线;
(2)取待测样品加入检测体系中反应;
(3)于分光光度计中测定515nm吸光值;
(4)将检测结果与标准曲线进行线性拟合,获得木寡糖含量;
其中,所述检测体系包括4-氨基安替比林,3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠盐,辣根过氧化物酶,磷酸盐缓冲液和木寡糖氧化酶。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述木寡糖氧化酶源自太瑞斯梭孢壳霉。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述木寡糖氧化酶具有如SEQ ID NO.11所示的氨基酸序列。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述木寡糖标准品为选自木二糖、木三糖、木四糖、木五糖中的一种或多种。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述检测体系包括10-30微升1mM-3mM 4-氨基安替比林,10-30微升10mM-40mM 3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠盐(DHBS),5U-10U辣根过氧化物酶,10-30微升1μM-20μM木寡糖氧化酶,用50-100mM磷酸盐缓冲液补到150-250微升。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述检测体系包括20微升1mM4-氨基安替比林,20微升10mM 3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠盐(DHBS),10U辣根过氧化物酶,20微升10μM木寡糖氧化酶,以及110微升100mM磷酸盐缓冲液。
7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述磷酸盐缓冲液为PH5.0-7.0。
8.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法的反应温度为30-70℃。
9.木寡糖氧化酶在测定木寡糖含量中的用途。
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