[发明专利]一种硒化青蛤多糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种硒化青蛤多糖的制备方法，通过S1，提取青蛤多糖；S2，制备磺酸甲基咪唑氯多孔磁性纳米粒子；S3，合成硒化青蛤多糖；所制备的青蛤多糖对癌细胞尤其肝癌细胞具有较好的抑制效果，对淋巴细胞增殖能力有明显增强作用；制备方法采用离子催化剂，硒化含量高，青蛤多糖链降解率低，所制备的离子催化剂可回收循环使用，解决了传统离子液体催化硒多糖中能耗高的问题。

技术领域

本发明涉及多糖制备领域，特别是涉及一种硒化青蛤多糖的制备方法。

背景技术

肝癌是世界上最恶性的癌症之一，也是癌症死亡的第三大主要原因。传统的治疗方法主要是手术切除，化疗和放疗，手术切除被认为是治疗肝癌的最佳方法，但是肿瘤细胞易转移并侵袭其他组织，放疗和化疗法会杀死辐射范围内的所有细胞，选择性差且副作用严重，降低了患者的生活质量，因此探索治疗肝癌的有效药物非常迫切。

硒是机体不可缺少的一种微量元素，对人体多种生理功能起着关键性的作用，人体缺硒会引起一系列的疾病，研究证实癌症、心脏病、关节炎和免疫系统功能紊乱等40多种疾病与缺硒有关。硒包括无机硒和有机，与无机硒化合物相比，有机硒化合物具有吸收率高、生物活性强和毒性低等诸多优点，不仅如此，有机硒类化合物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗病毒和抗菌等多种生物活性。

硒多糖既保持了多糖较高的生物利用率和参与机体生理代谢的特点，又具有硒的生物功能，且毒性和副作用大大降低，生物活性普遍高于硒和多糖。硒多糖的来源有三种：天然富硒生物提取、富硒生物转化和人工合成，所得硒多糖的硒含量通常依次升高。化学法制备硒多糖是目前报道较多的，其优势在于硒含量可控和相对便捷，但现有技术中硒含量低、能耗高，酸性的反应介质还会造成多糖的降解等问题。

发明内容

针对上述情况，本发明之目的在于提供一种硒化青蛤多糖的制备方法，通过载体离子催化剂解决了制备过程中能耗高、多糖降解率高的问题，所制备的硒化青蛤多糖硒含量高，对肝癌细胞具有着较高的抑制活性。

其解决的技术方案是，

一种硒化青蛤多糖的制备方法，由以下步骤制备：S1，提取青蛤多糖；S2，制备磺酸甲基咪唑氯多孔磁性纳米粒子；S3，合成硒化青蛤多糖；

所述步骤S3具体包括以下方法：(1)取青蛤多糖加入到DMSO中，75-85℃下搅拌3-4h，冷却至室温，得青蛤多糖悬浮溶液；(2)N₂气保护下，取硒试剂加入到DMSO，然后加入磺酸甲基咪唑氯多孔磁性纳米粒子，75-85℃下搅拌2-3h，得活化硒溶液；(3)N₂气保护下，将青蛤多糖悬浮溶液滴加到活化硒溶液，75-85℃下持续搅拌反应4-5h，通过磁析法回收磺酸甲基咪唑氯多孔磁性纳米粒子并用DMSO洗涤，然后过滤，DMSO洗涤滤饼，然后7000-8000r/min离心5-10min，取上清液，加入2-3倍的丙酮进行洗涤，重复上述方法洗涤，沉淀5-7次，直至丙酮层加入2％抗坏血酸未变红后停止洗涤。加入蒸馏水至沉淀层，并搅拌致沉淀层完全溶解，倒置透析袋中流水透析40-48h，待透析完成后使用2％的抗坏血酸检测未变红(如颜色变红需继续透析)，然后将透析液再次7000-8000r/min离心5-10min，取其上清液60-80℃下浓缩，加入丙酮进行沉淀，冷冻干燥40-48h，得硒化青蛤多糖；

进一步的，所述的硒试剂结构为：