[发明专利]一种生物分子及抑制剂类分子的检测方法在审

专利信息
申请号: 202110814009.6 申请日: 2021-07-19
公开(公告)号: CN113552122A 公开(公告)日: 2021-10-26
发明(设计)人: 胡琼政;平建涛;赵冰璐 申请(专利权)人: 山东省分析测试中心
主分类号: G01N21/80 分类号: G01N21/80;G01N21/84
代理公司: 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 代理人: 郑平
地址: 250014 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 生物 分子 抑制剂 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种生物分子的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:将待测物与粘性溶液或水凝胶混合,形成混合溶液,置于指示性试纸条一端,不同量的目标检测物引起粘性溶液或水凝胶的水解程度不同,因此粘性溶液或水凝胶分解释放出的水的含量不同,会在pH试纸条上产生不同距离的移动,通过移动距离的长短实现对目标检测物的检测。

2.如权利要求1所述的生物分子的检测方法,其特征在于,所述粘性溶液或水凝胶为水凝胶、透明质酸,明胶溶液,淀粉溶液,葡萄糖溶液、果胶溶液、海藻酸钠溶液、琼脂溶液、黄原胶溶液、槐豆胶溶液、甲基纤维素热溶液;

优选的,所述待测物为植物多糖或动物多糖;

优选的,所述待测物为果聚糖、甘露聚糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、粘多糖、壳聚糖;微生物多糖如肽聚糖;海藻多糖;蛋白质类物质;

进一步优选的,所述蛋白质类物质为酶,优选为淀粉酶、葡萄糖氧化酶、半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶脂酶、琼脂糖酶、黄原胶液化酶、甘露聚糖酶、纤维素酶;

优选的,所述粘性溶液或水凝胶为水凝胶,所述水凝胶与待测物有如下性质:水凝胶随待测物的浓度变化,分解能力增强;

优选的,所述水凝胶为明胶类水凝胶体系、透明质酸类水凝胶体系、DNA类水凝胶体系;

优选的,所述水凝胶为明胶类水凝胶体系,待测物为血清中胰蛋白酶;

优选的,所述水凝胶为透明质酸类水凝胶体系,待测物为透明质酸酶;

优选的,所述水凝胶为DNA类水凝胶体系,待测物为DNA剪切酶、赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA);

进一步优选的,所述水凝胶为磷酸活化后的明胶,待测物为血清中胰蛋白酶;

进一步优选的,磷酸在明胶中的比例为1-5wt%,进一步优选为5wt%;

优选的,所述粘性溶液或水凝胶为透明质酸,透明质酸的浓度为0.2-1wt%,进一步优选为1wt%。

3.如权利要求1所述的生物分子的检测方法,其特征在于,所述指示性试纸条为pH试纸条,聚酯膜类试纸条、碳纤维素膜类试纸条、玻璃纤维类试纸条中的一种,优选为pH试纸条;

进一步优选的,所述pH试纸条为常用广范试纸条,pH范围为1-14。

4.如权利要求1所述的生物分子的检测方法,其特征在于,所述生物分子浓度的检测方法在疏水性基板上进行,先将混合溶液滴在疏水性基板上,一段时间后,再将指示性试纸条一端置于液滴上表面;

优选的,所述疏水性基板材料包括聚碳酸酯板、聚苯乙烯板、聚甲基丙烯酸甲酯板、PVC板等中的一种;

优选的,所述一段时间为3-7分钟,进一步优选为5分钟。

5.如权利要求1所述的生物分子的检测方法,其特征在于,还包括粘性溶液或水凝胶浓度的优化过程,包括如下步骤:使用磷酸盐缓冲溶液配置不同质量浓度的粘性溶液或水凝胶溶液,分别将其滴加到疏水性基底板上,观察液滴在一段时间后的是否可以变成凝胶,此时选择液滴变成凝胶状态时对应的粘性溶液或水凝胶浓度作为最适浓度,用于下一步检测;

优选的,所述一段时间为1-30分钟,进一步优选为5分钟;

或,还包括疏水性基底板清洗过程,包括如下步骤:使用乙醇和去离子水的混合溶液超声清洗多次;

优选的,乙醇和去离子水的体积比为1:1.5-2.5,进一步优选为1:2;

优选的,超声次数为3-5次,进一步优选为3次;

优选的,每次超声时间为4-6分钟,进一步优选为5分钟;

或,还包括待测样品孵育过程,包括如下步骤,待检测样品与水凝胶溶液混合,将混合溶液置于合适温度环境下孵育一段时间;

优选的,所述检测样品与水凝胶溶液体积比为1:1.2,优选为1:1;

优选的,将混合溶液置于37℃环境下孵育15分钟。

6.如权利要求1所述的生物分子的检测方法,其特征在于,还包括指示性试纸条刻度获取过程,包括如下步骤:将不同标准浓度的待测物与分别水凝胶混合,分别置于指示性试纸条一端,将浓度对应的刻度记录,用于后续对目标检测浓度进行对照。

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