[发明专利]一种玉米醇溶蛋白-多酚共价复合物及其制备方法

权利要求书

1.一种玉米醇溶蛋白–多酚共价复合物的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：

1）称取一定量的玉米醇溶蛋白溶于70% (v/v)的乙醇-水溶液中，超声5 min，200 rpm搅拌30 min，使其完全溶解；

2）称取一定量多酚溶于70% (v/v)的乙醇-水溶液中，超声5 min，200 rpm搅拌30 min使其完全溶解；

3）在4℃下，向步骤2）的多酚溶液中加入一定量的EDC，随后加入一定量的NHS，隔绝氧气300 rpm连续搅拌反应0.5–2 h；

4）将步骤3）的多酚溶液缓慢加入步骤1）的玉米醇溶蛋白溶液中，将pH调至6.5，在300rpm连续搅拌的条件下，4℃，隔绝氧气反应1 h，之后25℃下反应24 h；

5）在反应过程中，每隔四个小时测量反应液的pH，通过加入0.1M的NaOH 和0.1M的HCl维持pH在固定值；

6）反应结束后，将混合物过超滤装置，将超滤得到的液体置于超声中透析；

7）将透析后的样品用纳米研磨机处理，经预冻，冷冻干燥后得到玉米醇溶蛋白–多酚共价复合物；

其中所述步骤1）混合体系中玉米醇溶蛋白的浓度为5 mg/mL–25 mg/mL；步骤2）中多酚的浓度为2–30 mmol/L；步骤3）中EDC的量为多酚添加量的1–5倍，NHS的添加量为多酚的1–3倍；

所述步骤4）混合体系中玉米醇溶蛋白与多酚的质量比为1.5:1–10:1；

多酚选自绿原酸(CGA)、没食子酸(GA)、咖啡酸、原儿茶酸、迷迭香酸的一种。

2. 根据权利要求1所述的玉米醇溶蛋白–多酚共价复合物的制备方法，其特征在于，步骤6）中超滤膜的分子量选择30 kDa，透析袋的分子量选择3500 Da，透析时间48 h，透析温度 4℃。

3. 根据权利要求1所述的玉米醇溶蛋白–多酚共价复合物的制备方法，其特征在于，步骤7）中预冻条件为–40℃预冻24 h，冷冻干燥的时间为48 h。

4.根据权利要求2所述的玉米醇溶蛋白–多酚共价复合物的制备方法，其特征在于，EDC的量为多酚添加量的3倍，NHS的添加量为多酚的2倍。

5.根据权利要求1所述的玉米醇溶蛋白–多酚共价复合物的制备方法，其特征在于，其中所述步骤1）中添加0.001%w/v的山梨酸钾。