[发明专利]一种猪苓汤物质基准的质量控制方法

说明书

本发明属于药品质量控制技术领域，具体涉及一种猪苓汤物质基准的质量控制方法，包括确立制备工艺和建立质量评价体系。该质量控制方法采用薄层色谱鉴别、含量测定、特征图谱方法相结合，具体包括建立氨基酸类、三萜类高效液相色谱特征图谱以及氨基酸类含量的检测方法、测定待测多糖含量和薄层鉴别等方面，通过特征图谱中特征峰的相对保留时间以及氨基酸类含量等来控制和评价其质量。本发明建立了全面控制猪苓汤物质基准的质量评价体系，为猪苓汤复方制剂的合理开发应用提供了研究基础。

技术领域

本发明涉及药品质量控制技术领域，具体地说，涉及一种猪苓汤物质基准的质量控制方法。

背景技术

猪苓汤，首见于汉·张仲景的《伤寒论》，其药物组成为：“猪苓（去皮）、茯苓、泽泻、阿胶、滑石（碎）各一两” 。主治水热互结伤阴证。症见小便不利，发热，口渴欲饮，或心烦不寐，或兼有咳嗽，呕恶，下利。舌红苔白或微黄，脉细数者。又治血淋，小便涩痛，点滴难出，小腹满痛者。临床还应用于治疗水热互结所致的瘟疫，脚气，淋病，血痢，痰饮，黄疸，麻疹、痘疹兼证，以及目有黑花等疾病。猪苓汤在现代临床中主要用于治疗治疗泌尿系统如肾病综合征、泌尿感染、术后排尿困难、慢性肾炎、慢性肾小球肾炎、尿路结石等疾病，以及肝硬化腹水、急性腹泻等。猪苓汤所治疗疾病的范围虽广，但总以利水消肿为主要治疗大法。猪苓汤被列入首批公布的经典名方100首中，表明其具有较高的开发应用价值。

猪苓汤在《伤寒论》中已有煎煮、服用方法，但由于现代和汉代的计量单位存在较大的差异，需要对计量单位换算进行考证，且《中国药典》中只有单味药的检测方法，其复方（汤剂及物质基准）尚无源于传统制法且符合现代制备技术的制备方法，缺乏客观的复方（汤剂及物质基准）质量评价体系。

专利文献CN110946761A，公开日2020.04.03，公开了一种猪苓汤基准物质的制备方法和定性检测方法。所述定性检测方法包括：取猪苓药材、茯苓药材、泽泻药材和23-乙酰泽泻醇B分别制作对照溶液，取猪苓汤基准物质制备两种不同的供试品溶液，采用薄层色谱法、高效液相色谱法对猪苓汤物质基准中的猪苓、茯苓、泽泻进行定性鉴别。

然而目前未见如本发明的猪苓汤物质基准的质量控制方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种猪苓汤物质基准的质量控制方法，为经典名方猪苓汤复方制剂开发提供可靠的质量属性的研究方法和评价体系。

为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种猪苓汤物质基准的质量控制方法，包括建立氨基酸类、三萜类高效液相色谱特征图谱以及氨基酸类含量的检测方法，通过特征图谱中特征峰的相对保留时间以及氨基酸类含量来控制和评价其质量；具体包括如下步骤：

（1）氨基酸类含量的检测方法和氨基酸类高效液相色谱特征图谱建立，具体如下：

①高效液相色谱检测条件为：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1mol/L醋酸钠溶液（用醋酸调节pH值至6.5）为流动相B；以水为流动相C，按下表1中的规定进行梯度洗脱；检测波长为254nm，柱温为43℃；进样量5μl，理论板数按L-羟脯氨酸峰计算应不低于4000；

②制备参照物溶液和供试品溶液，然后分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸的含量，同时供试品色谱中应呈现12个特征峰，并应与对照品参照物色谱中的12个特征峰保留时间相对应；