[发明专利]一种重组人血小板衍生因子（rhPDGF-BB）-Fc融合蛋白及其使用

说明书

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种重组人血小板衍生因子(rhPDGF‑BB)‑Fc融合蛋白及其使用，该融合蛋白由人PDGF‑BB和人IgG Fc1片段组成，融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。该融合蛋白可在酵母细胞中高效表达，且纯化工艺简单，利于进一步的大规模制备。本发明所获得的rhPDGF‑BB‑Fc与天然PDGF‑BB比较，能够有效提高药物体内半衰期和减少药物用量，同时具有在相同药物剂量上仍保持与天然PDGF‑BB相似的生物学活性；可缩短伤口愈合时间，降低药物成本，满足产业发展的需要。

技术领域

本发明涉及基因工程药物技术领域，尤其涉及一种重组人血小板衍生因子(rhPDGF-BB)-Fc融合蛋白及其使用。

背景技术

血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)主要是由损伤部位的血小板分泌的一种细胞因子。研究发现，PDGF有着广泛的生物学活性，特别是在促进神经再生、血管形成和创伤修复中起重要作用。PDGF作为神经生长和营养因子可用于中枢及外周神经损伤、缺血性脑病、脑外伤及中风后遗症、脑发育不全、癫痫、小脑萎缩、痴呆、偏瘫、脊髓外伤术后治疗等；作为血管形成和再生因子可用于慢性心肌缺血(冠心病)、急慢性心肌梗塞等疾病；PDGF作为创伤愈合的组织修复因子能促进成纤维细胞、平滑肌细胞和毛细血管内皮细胞的增殖，加速创伤肉芽组织的形成，可用于皮肤损伤、烧烫伤、溃疡(例如角膜溃疡、胃溃疡、十二指肠溃疡、溃疡性结肠炎等)、褥疮、整形美容后伤口等各种创伤创面的治疗，因此具有广泛的临床应用价值。

作为一种生物活性分子，保证其生物活性，必要的条件是有正确的三维构象和糖基化修饰。具有完善翻译后修饰功能是真核表达载体被选作大多数生物药蛋白表达宿主的原因。采用毕赤酵母表达载体，能提高二聚体蛋白产量，保证重组蛋白生物学活性，且适合大规模生产。既要保证产量和生物学活性，又要提高其在体内的半衰期，是重组PDGF蛋白药物研发的关键。

Fc来自于人免疫球蛋白IgG，它通过FcRn介导的再循环机制使其半衰期延长，避免蛋白酶的降解，因此，Fc可以作为伴侣蛋白延长目的蛋白在体内的半衰期。另外Fc本身形成二聚体，因此有助于二聚体蛋白的形成，增强二聚体蛋白的生物学活性。

现有技术中，重组血小板衍生因子(PDGF)存在表达量低、纯化困难和半衰期短的问题，需要进行优化改进。

发明内容

本发明第一目的在于提供一种重组人血小板衍生因子(rhPDGF-BB)-Fc融合蛋白，以解决现有技术中重组血小板衍生因子(PDGF)表达量低、纯化困难和半衰期短的问题。

本发明的第二目的在于提供重组人血小板衍生因子(rhPDGF-BB)-Fc融合蛋白的制备方法。

本发明的第三目的在于提供重组人血小板衍生因子(rhPDGF-BB)-Fc融合蛋白的纯化方法。

本发明的第四目的在于提供含有重组人血小板衍生因子(rhPDGF-BB)-Fc融合蛋白的蛋白凝胶剂，及其在促进伤口愈合方面的应用。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明是通过以下技术方案实现：

根据本发明的目的，本发明提供一种重组人血小板衍生因子(rhPDGF-BB)-Fc融合蛋白，该融合蛋白由人PDGF-BB和人IgG Fc1片段组成。

进一步地，如上所述的重组人血小板衍生因子(rhPDGF-BB)-Fc融合蛋白，所述融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

含有如上所述重组人血小板衍生因子(rhPDGF-BB)-Fc融合蛋白的重组表达载体。

进一步地，如上所述的重组表达载体，该重组表达载体为毕赤酵母表达载体。