[发明专利]吖啶酯类似物在制备吖啶酯类似物标记抗体中的应用在审
申请号: | 202110783301.6 | 申请日: | 2021-07-12 |
公开(公告)号: | CN113533735A | 公开(公告)日: | 2021-10-22 |
发明(设计)人: | 曹亦菲 | 申请(专利权)人: | 博以新(杭州)生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/58 | 分类号: | G01N33/58;G01N33/577;G01N33/78;G01N33/53 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 张梦泽 |
地址: | 310000 浙江省杭州市余杭区仓前街*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 吖啶酯 类似物 制备 标记 抗体 中的 应用 | ||
本发明提供了吖啶酯类似物在制备吖啶酯类似物标记抗体中的应用,属于生物医学检测技术领域。本发明中,吖啶酯类似物用于标记抗体,样本中的抗原和酶标抗原竞争结合吖啶酯类似物标记的抗体,形成免疫复合物。该复合物中吖啶酯类似物与酶彼此靠近,在激发液的作用下发光底物吖啶酯类似物被复合物中的酶催化裂解,形成不稳定的激发态中间体,当激发态中间体回到基态时便发出光子,产生的光子数与样本中抗原的浓度成反比,据此可计算得到样本中抗原的浓度。本申请将吖啶酯类似物用于竞争法检测,检测抗体能够与待测分析物于均相体系中进行免疫反应,不需要微孔板、磁珠或微球作为载体包被抗体,是一种免分离的化学发光技术。
技术领域
本发明涉及生物医学检测技术领域,尤其涉及吖啶酯类似物在制备吖啶酯类似物标记抗体中的应用。
背景技术
免疫检测(immunodiagnosis)是应用免疫学的理论、技术和方法诊断各种疾病和测定免疫状态。免疫检测试剂在诊断试剂盒中品种最多,广泛应用于医院、血站、体检中心,主要用于肝炎检测、性病检测、肿瘤检测、孕检等。免疫检测的方法包括夹心法、间接法和竞争法。目前的免疫检测主要是竞争法,竞争法的基本原理是:①把抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②把抗原或抗体与某一种酶连接成酶标抗原或酶标抗体,这种酶标抗原或酶标抗体既保留其抗原或抗体的免疫活性,又保留酶的活性。
在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅定性或定量分析。但是抗原或抗体需要结合到固相载体上,操作繁琐。
发明内容
本发明的目的在于提供吖啶酯类似物在制备吖啶酯类似物标记抗体中的应用,将吖啶酯类似物用于竞争法检测中吖啶酯类似物标记抗体,能够摆脱固相载体的限制。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了吖啶酯类似物在制备吖啶酯类似物标记抗体中的应用;
所述吖啶酯类似物的分子结构式如式I所示;
本发明还提供了吖啶酯类似物在制备竞争法检测试剂盒中的应用;所述吖啶酯类似物的分子结构式如式I所示;
本发明还提供了一种竞争法检测试剂盒,包括吖啶酯类似物标记的抗体、酶标抗原和激发液;
所述吖啶酯类似物的分子结构式如式I所示;
优选的,还包括本底抑制剂。
优选的,所述本底抑制剂包括摩尔浓度为20~30mM的羟基二乙胺水溶液。
优选的,所述激发液包括以下浓度的组分:20~30mM tris、0.5~1.5mM对苯基苯酚、0.3~0.8mM EDTA、0.1%~0.3%吐温-20和3~8mM过氧化脲;所述tris的pH值为7.8~8.2。
优选的,所述酶标抗原包括辣根过氧化物酶标记的抗原。
优选的,所述竞争法检测试剂盒包括T3检测试剂盒、T4检测试剂盒、克伦特罗检测试剂盒或莱克多巴胺检测试剂盒。
优选的,所述吖啶酯类似物标记的抗体包括吖啶酯类似物标记的T3单克隆抗体、吖啶酯类似物标记的T4单克隆抗体、吖啶酯类似物标记的克伦特罗单克隆抗体或吖啶酯类似物标记的莱克多巴胺单克隆抗体。
本发明还提供了一种非诊断目的的竞争法检测方法,包括以下步骤:
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