[发明专利]一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法

权利要求书

1.一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征包括以下步骤：

（1）二级种液体菌种培养基的制备：按质量比称取25% 蔗糖，1% 黄豆粉，1.5% 磷酸二氢钾，1.5% 七水硫酸镁，1% 硫酸铵，VB1 50mg， 用蒸馏水混合定溶至1000mL，液体培养基；

（2）二级种液体菌种灭菌与接种：121 ℃ 高温灭菌大于30 min，冷却至20-30℃ 后，接入冬荪鬼笔菌母种；

（3）二级种液体菌种培养：冬荪鬼笔斜面种接种后在20 ℃，110r/min的恒温摇床中暗培养，8d内得到菌球大小均匀、培养基清澈的二级液体菌种；

（4）三级种固体菌棒培养基制备：按重量比称取原料制作三级菌种培养基：70% 主料（构树木屑）、10 % 辅料（黄豆茎秆碎屑）、3 % 玉米芯碎屑，2 % 硫酸镁，2 %磷酸二氢钾，1% 碳酸钙，1% 白糖，1 % VB1；

（5）三级种固体菌棒灭菌与接种：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌；待菌袋冷却至30℃以下；在超净工作台上打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级种液体菌种用5 mL无菌注射器接入5 mL到菌袋中间部位，盖好透气盖；

（6）三级种固体菌棒培养：将步骤（5）接菌完成后的菌袋避光通风培养，待菌丝发满菌后，得到可移入林下覆土栽培的菌棒。

2.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于步骤（1）中所述二级种液体菌种培养基浓度为30.05g/L。

3.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于步骤（1）中所述二级种液体菌种培养基pH 6.0。

4.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于所述步骤（2）中，121 ℃ 高温灭菌30 min，冷却至25℃后，接入冬荪鬼笔母种。

5.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于所述步骤（4）是按重量比称取三级菌种培养基的原料后进行均匀搅拌后配置成湿度55%-65%，pH 6.0，之后装入规格15*18*0.005cm的聚丙烯菌袋中，盖好透气盖。

6.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于所述步骤（5）中：将步骤（4）中得到的培养基在121℃、101kpa环境下进行3小时高温高压灭菌；待菌袋冷却至20-30℃；打开菌袋透气盖，将步骤（3）中获得的二级种液体菌种接入5mL到菌袋中间部位。

7.根据权利要求1所述一种冬荪鬼笔液体菌种制作及生产菌棒的配套方法，其特征在于所述步骤（6）是将步骤（5）接菌完成后的菌袋于室温 18-25 ℃，湿度保持在40%-60%避光通风培养。