[发明专利]趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的生物制备方法在审
| 申请号： | 202110777218.8 | 申请日： | 2021-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN113584090A | 公开（公告）日： | 2021-11-02 |
| 发明（设计）人： | 王普;林洪鑫;包能铖;段志文 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12P7/22 | 分类号： | C12P7/22;C12N1/14;C07C29/86;C07C29/76;C07C33/46;C12R1/645 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 因子 ccr 拮抗剂 ad101 手性 中间体 生物 制备 方法 | ||
1.一种趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的生物制备方法，其特征在于所述的方法为：以林生地霉ZJPH1811菌株发酵培养获得的湿菌体为催化剂，以1-(4-三氟甲基苯基)乙酮为底物，以pH值6.0-8.0的磷酸盐缓冲液为反应介质构成转化体系，在25-50℃，150-250rpm条件下进行转化反应4-48h，反应结束后，向转化液中加入与转化液等体积的乙酸乙酯终止反应并萃取，离心后取上清液，即可获得含所述趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的乙酸乙酯萃取液；其中，所述湿菌体的用量以菌体湿重计为50～500g/L所述的磷酸盐缓冲液，所述1-(4-三氟甲基苯基)乙酮的质量以所述的磷酸盐缓冲液的体积计为0.5～6g/L；
所述林生地霉ZJPH1811菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2020年7月6日，保藏编号：CCTCC NO：M 2020281，保藏地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430072。
2.如权利要求1所述的趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的生物制备方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.01M-0.2M。
3.如权利要求1所述的趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的生物制备方法，其特征在于：所述转化反应为30-40℃、200rpm条件下转化24h。
4.如权利要求1所述的趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的生物制备方法，其特征在于：所述转化体系中还添加有辅助底物，所述辅助底物为下列之一：葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甲醇、异丙醇、甘油、L-丙氨酸、L-谷氨酸或L-赖氨酸；所述辅助底物添加量以所述的磷酸盐缓冲液的体积计为4～200g/L。
5.如权利要求4所述的趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的生物制备方法，其特征在于：所述辅助底物为葡萄糖、甘油或L-赖氨酸。
6.如权利要求4所述的趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的生物制备方法，其特征在于：所述辅助底物添加量以所述的磷酸盐缓冲液的体积计为60～100g/L。
7.如权利要求4所述的趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的生物制备方法，其特征在于：所述湿菌体的用量以所述的磷酸盐缓冲液计为200g/L。
8.如权利要求4所述的趋化因子CCR 5拮抗剂AD101手性中间体的生物制备方法，其特征在于：所述1-(4-三氟甲基苯基)乙酮的质量以所述的磷酸盐缓冲液的体积计为1.88g/L。
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