[发明专利]一种无细胞翻译体系、方法及产物在审
申请号: | 202110767512.0 | 申请日: | 2021-07-07 |
公开(公告)号: | CN113409887A | 公开(公告)日: | 2021-09-17 |
发明(设计)人: | 张晓荣;赵谦 | 申请(专利权)人: | 中国科学院生物物理研究所 |
主分类号: | G16B20/20 | 分类号: | G16B20/20 |
代理公司: | 北京华创智道知识产权代理事务所(普通合伙) 11888 | 代理人: | 褚战星 |
地址: | 100101 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 翻译 体系 方法 产物 | ||
1.一种无细胞翻译体系,其特征在于,包含:5’帽子及3’多聚腺苷酸的mRNA、氨基酸混合物、能量分子及mRNA翻译酶源的混合物;所述能量分子包含磷酸肌酸。
2.根据权利要求1所述的翻译体系,其特征在于,所述能量分子还包含ATP和鸟苷三磷酸(GTP)。
3.根据权利要求1或2所述的翻译体系,其特征在于,所述氨基酸混合物包含丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸的混合物。
4.根据权利要求1或2所述的翻译体系,其特征在于,所述mRNA翻译酶源包含真核细胞裂解上清液。
5.一种无细胞翻译方法,其特征在于,包含权利要求1-4任一项所述的翻译体系,包含以下步骤:
步骤(1)转录具有5’帽子及3’多聚腺苷酸的mRNA;
步骤(2)向反应容器内加入所述mRNA、氨基酸混合物、能量分子及mRNA翻译酶源,反应制得含有目的蛋白的混合溶液一;
步骤(3)将所述混合溶液一处理得目的蛋白。
6.根据权利要求5所述的翻译方法,其特征在于,所述能量分子包括ATP、磷酸肌酸和鸟苷三磷酸(GTP)。
7.根据权利要求5所述的翻译方法,其特征在于,所述mRNA翻译酶源包含真核细胞裂解上清液,由真核细胞裂解离心制得。
8.根据权利要求5或6所述的翻译方法,其特征在于,所述步骤(2)所述反应条件为温度35-39℃下反应10-120min。
9.根据权利要求5或6所述的翻译方法,其特征在于,所述步骤(3)处理方法包括凝胶电泳分析。
10.一种无细胞翻译产物,其特征在于,由权利要求1-4任一项所述翻译体系及权利要求5-8任一项所述翻译方法制备。
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