[发明专利]一种蛋白提取试剂配方在审
申请号: | 202110763914.3 | 申请日: | 2021-07-06 |
公开(公告)号: | CN113563410A | 公开(公告)日: | 2021-10-29 |
发明(设计)人: | 朱也;陈莉;赵志远 | 申请(专利权)人: | 南京瑞源生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14 |
代理公司: | 北京化育知识产权代理有限公司 11833 | 代理人: | 闫露露 |
地址: | 210000 江苏省南京市栖霞*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 提取 试剂 配方 | ||
本发明涉及蛋白质提取技术领域,并提出一种蛋白提取试剂制备方法,包括以下步骤:S1、按照比例称取配方量的原料,将HEPES、KCL放置于ph等于7.5的混合液中进行充分的搅拌;S2、配制10%的Tr itonX‑100溶液并充分搅拌;S3、再量取适量1M的DTT溶液放置于-20℃的保温箱中进行保温;S4、量取适量50×蛋白酶抑制剂PI溶液放置于-20℃的保温箱中进行保温;S5、再将上述溶液混合在一起后得到蛋白提取试剂。该蛋白质提取剂配方,先量取各种提取剂的原材料然后进行配比,通过搅拌使配比剂原料混合均匀,然后通过在科学的配比制作出四个对比例,然后对对比例中的样本进行实验检测,利用离心机的搅拌对蛋白质进行提取检验,最终可以确定出最佳的蛋白质提取试剂配方。
技术领域
本发明涉及蛋白质提取技术领域,具体为一种蛋白提取试剂配方。
背景技术
以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质,蛋白质的制备一般分为以下四个阶段:选择材料和预处理,细胞的破碎及细胞器的分离,提取和纯化,浓细、干燥和保存。
在蛋白质的分离提取过程中一般需要用到蛋白质提取试剂,提取试剂的材料配比有许多种,但是由于技术有限,蛋白质提取试剂的制备难以大范围推广,所以亟需一种蛋白提取试剂配方。
发明内容
为了解决上述技术问题,本发明提供蛋白提取试剂配方及其制备方法,由以下具体技术手段所达成:
本发明为实现技术目的采用如下技术方案:一种蛋白提取试剂配方,由以下重量份数的原料组成:
试剂一:19~21份;
试剂二:0.9~1.1份;
试剂三:19~21份;
试剂四:961.1~956.1份。
优选的,所述试剂一包含HEPES、KCL、EDTA、ph等于7.5的混合液。
优选的,所述试剂二包含浓度10%的TritonX-100溶液。
优选的,所述试剂三包含DTT溶液。
优选的,所述试剂四包含50×蛋白酶抑制剂PI。
根据权利要上述的一种蛋白提取试剂配方,现提出一种蛋白提取试剂制备方法,包括以下步骤:
S1、按照比例称取配方量的原料,将HEPES、KCL放置于ph等于7.5的混合液中进行充分的搅拌,并放置于4℃的保温箱中备用;
S2、配制10%的TritonX-100溶液,并充分搅拌后放置于无菌箱中保存;
S3、再量取适量1M的DTT溶液放置于-20℃的保温箱中进行保温;
S4、量取适量50×蛋白酶抑制剂PI溶液放置于-20℃的保温箱中进行保温;
S5、再将上述HEPES、KCL、EDTA混合液与浓度为10%的TritonX-100溶液、DTT溶液以及50×蛋白酶抑制剂PI混合在一起后再加入试剂一使溶液混合均匀,最后进行搅拌从而制得蛋白质提取液。
有益效果
与现有技术相比,本发明提供了一种蛋白提取试剂配方,具备以下有益效果:
该一种蛋白提取试剂配方,先量取各种提取剂的原材料然后进行配比,通过搅拌使配比剂原料混合均匀,然后通过在科学的配比制作出四个对比例,然后对对比例中的样本进行实验检测,利用离心机的搅拌对蛋白质进行提取检验,最终可以确定出最佳的蛋白质提取试剂配方。
具体实施方式
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