[发明专利]样品中芍药苷、甘草苷、甘草酸、丹皮酚和人参皂苷含量检测方法及在温经汤质控中的应用在审
申请号: | 202110762112.0 | 申请日: | 2021-07-06 |
公开(公告)号: | CN115575514A | 公开(公告)日: | 2023-01-06 |
发明(设计)人: | 吴革林;杜玉苹;谭琴;黄淑萍;周雨;郭姜凤;李敏;付艳 | 申请(专利权)人: | 扬子江药业集团有限公司;扬子江药业集团江苏龙凤堂中药有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54;G01N30/74 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 刘雅婷 |
地址: | 225321 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 样品 芍药 甘草 丹皮 人参 皂苷 含量 检测 方法 温经汤质控 中的 应用 | ||
1.一种样品中芍药苷、甘草苷、甘草酸、丹皮酚和/或人参皂苷含量的检测方法,其特征在于,包括:
将样品进行第一提取处理,收集第一提取液,将所述第一提取液进行第一液相色谱检测,基于检测结果确定所述样品中芍药苷、甘草苷、甘草酸和/或丹皮酚含量;和/或
将样品进行第二提取处理,收集第二提取液,将所述第二提取液进行第二液相色谱检测,基于检测结果确定所述样品人参皂苷含量;
其中,所述第一提取处理中采用的第一提取溶剂包括甲醇溶液;
所述第二提取处理中采用的第二提取溶剂包括水饱和正丁醇。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述第一提取处理包括:
将样品与第一提取溶剂进行超声混合15~45分钟,优选25~35分钟;
任选地,基于1克所述样品,所述第一提取溶剂的添加量为30~50毫升,所述甲醇溶液的浓度为30~60体积%;
任选地,所述第一液相色谱检测的条件如下:
色谱柱为C18柱;
流动相包括流动相A和流动相B,所述流动相A选自乙腈,所述流动相B选自0.05~0.2体积%甲酸溶液;
流速为0.5~1.5mL/min;
柱温为20~30℃;
进样量为5~15μL;
当测定芍药苷和/或甘草苷时,检测波长为230~240nm;
当测定甘草酸时,检测波长为240~260nm;
当测定丹皮酚时,检测波长为270~290nm;
任选地,所述第二液相色谱检测的条件如下:
色谱柱为C18柱;
流动相选自乙腈水溶液;
流速为0.5~1.5mL/min;
柱温为25~35℃;
检测波长为200~205nm;
进样量为5~15μL。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,当测定芍药苷和/或甘草苷时,所述第一液相色谱检测采用的洗脱方式如下:
0~8min,流动相A为17%,补足流动相B至100体积%;
8~10min,流动相A由17体积%升至19体积%,补足流动相B至100体积%;
10~20min,流动相A由19体积%升至25体积%,补足流动相B至100体积%;
20~25min,流动相A由25体积%升至70体积%,补足流动相B至100体积%;
25~35min,流动相A由70体积%降至17体积%,补足流动相B至100体积%;
当测定甘草酸和/或丹皮酚时,所述第一液相色谱检测采用的洗脱方式如下:
0~15min,流动相A由27体积%升至38体积%,补足流动相B至100体积%;
15~20min,流动相A由38体积%升至42体积%,补足流动相B至100体积%;
20~25min,流动相A由42体积%升至55体积%,补足流动相B至100体积%;
25~30min,流动相A由55体积%升至90体积%,补足流动相B至100体积%;
30~35min,流动相A由90体积%降至27体积%,补足流动相B至100体积%;
所述第二液相色谱检测采用的洗脱方式如下:
0~35min,流动相A为19体积%;35~55min,流动相A由19体积%升至29体积%;55~70min,流动相A为29体积%;70~110min,流动相A由29体积%升至40体积%。
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