[发明专利]一种利用粪菌移植提高昆明犬幼犬抗运输应激能力的方法

说明书

本发明公开了一种利用粪菌移植提高昆明犬幼犬抗运输应激能力的方法，属于生物技术领域。包括以下步骤：粪便供体筛选；选择养殖条件相同、警用性能优良幼公犬的外祖母作为菌源供体；制备粪菌原液，低温保存；移植时，制备粪菌移植液；灌胃至来源于同一健康外祖母、45～55日龄的不同健康幼公犬，连续灌胃≥14天；饲喂无抗饲料。本发明可以促进血清中ALT、AST、CK、GLU、LDH、ACTH和COR浓度下降，进而显著提高幼犬的抗运输应激能力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体的说是涉及一种利用粪菌移植提高昆明犬幼犬抗运输应激能力的方法。

背景技术

昆明犬有草黄、狼青、黑背3个品系，其对高原气候、严寒环境及高温均具有较强的适应性，且警用性能突出且易于训练，广泛使用在边防巡逻、侦查破案、搜查毒品和爆炸物等领域，服务于我国军队、公安刑侦战线。

随着大型活动与赛事的增加，从各地调集警犬参与安检搜爆工作任务的频率越来越高。尽管专用警犬运输车具有的保障设施能在一定程度改善运输条件，但运输过程中装卸、颠簸、饥渴、冷热以及陌生环境刺激等因素，均可诱导警犬发生严重的应激反应。警犬对运输应激的适应能力有个体和品种差异，如不能适应，就会出现精神萎靡、食欲不振、咳嗽、腹泻、呼吸和心率加快，影响警用性能的发挥和完成工作任务的质量，严重时休克和虚脱，甚至死亡，造成巨大的经济损失。

粪菌移植(Fecal Microbiota Transplantation,FMT)是指将健康供体动物粪便的功能菌群移植到受体动物的胃肠道中，通过调整、修复、重塑受体动物的肠道菌群，达到治疗动物疾病、促进生长和提高免疫力的目的。已有研究证实，FMT可治疗人类患者的炎症性肠病和肠易激综合症，提高猪、鸡的生长性能和免疫力。而关于利用FMT技术提高警(军)犬抗运输应激能力的方法，尚无见文献报道。

因此，如何提供利用粪菌移植提高昆明犬幼犬抗运输应激能力的方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种利用粪菌移植提高昆明犬幼犬抗运输应激能力的方法，对于警(军)犬工作具有重要经济和社会意义。同时，简单易行，可操作性强，应用前景广阔。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种利用粪菌移植提高昆明犬幼犬抗运输应激能力的方法，包括以下步骤：

(1)粪便供体筛选：选择养殖条件相同、警用性能优良幼公犬的外祖母作为菌源供体；

(2)采集供体的新鲜粪便预处理，在无菌条件下，通过溶解、过滤、离心、悬浮制备粪菌原液，加入无菌甘油，得粪菌原液，冻存备用；

(3)移植时，溶解冻存的粪菌原液，离心去除甘油和上清液，加入0.9％无菌生理盐水，重悬沉淀制备粪菌移植液；

(4)将粪菌移植液灌胃至来源于同一健康外祖母、45～55日龄的不同健康幼公犬，连续灌胃≥14天；饲喂无抗饲料。

进一步的：幼公犬和外祖母养殖条件相同。

警用性能优良：根据幼犬警用素质行为评分标准，得分在37分以上。

有益效果在于：新生哺乳动物肠道菌群具有强烈的母源性特征，母体来源的微生物在子代肠道菌群的形成过程中发挥重要作用，而幼龄动物的肠道菌群又对营养物质代谢、免疫系统的激活以及肠屏障功能的构建发挥重要作用，故不选择幼犬父系作为供体。另一方面，一般来说每头母犬平均每胎可生7-9头幼犬，如果选择幼犬的母亲，就必须将几头甚至更多的幼犬母亲的粪便进行混合，而混合操作会破坏粪菌液中发挥作用的厌氧菌的丰度和多样性，从而影响粪菌移植效果，而选择幼犬的外祖母，采集其粪便制备粪菌移植液，可减少操作，增加粪菌液中厌氧菌的数量和丰富，从而保证粪菌移植的效果。

优选的：步骤(1)供体为狼青品系昆明犬；选择标准如下：