[发明专利]特异性结合H1.4移码突变蛋白的单克隆抗体制备及其应用

说明书

本发明公开了特异性结合H1.4移码突变蛋白的单克隆抗体制备及其应用。具体地公开了特异性结合H1.4移码突变蛋白的检测性抗体或其抗原结合部分，包含氨基酸序列是SEQ ID No.1的重链和氨基酸序列是SEQ ID No.2的轻链。本发明首次利用H1.4移码突变体多肽半抗原制备了针对H1.4移码突变蛋白的鼠单克隆抗体，并且制备的抗体可以与H1.4移码突变蛋白特异性结合，能快速、灵敏、准确地检测出H1.4移码突变，为H1.4移码突变导致自闭症机制发生的研究提供了必不可少的实验材料，为自闭症患者的诊断提供了检测基础，在自闭症的诊断或辅助诊断领域、相关疾病的靶向药物开发领域，具有广泛的应用前景和重要的意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及特异性结合H1.4移码突变蛋白的单克隆抗体制备及其应用。

背景技术

染色质是真核生物遗传物质的载体。核小体是染色质的基本结构单位，由组蛋白和DNA构成。组蛋白是染色质的基本结构蛋白，分别为H1、H2A、H2B、H3、H4，其中H1是最早发现的组蛋白，其余4种为核心组蛋白。真核生物细胞内的DNA不是裸露存在的，而是缠绕在组蛋白八聚体(H2A、H2B、H3、H4各2个分子形成)构成的核心结构外侧形成的核小体连成的串珠结构，组蛋白H1不构成核小体，而是结合在核小体连接DNA的进出口端。核小体串珠结构在连接组蛋白H1的作用下进一步折叠形成30nm染色质结构，再逐级压缩形成染色体储存在细胞核中，H1介导的30nm染色质结构一直以来备受关注，作为染色体的基本结构蛋白，组蛋白H1在表观调控、基因转录、DNA复制、DNA损伤修复、染色体重塑等方面发挥重要作用。

组蛋白H1有多个变体。在人和小鼠中已经鉴定出了11种变体，包括七种体细胞亚型H1.0、H1.1、H1.2、H1.3、H1.4、H1.5、H1X，三种睾丸特异性亚型H1t、H1T2、HILS1和一种卵母细胞特异性亚型H1oo。连接组蛋白H1及其变体在不同生物学过程中行使不同的多功能。近年来文献报道连接组蛋白H1的变体H1.4的羧基端的移码突变会导致自闭症，患者同时表现为发际线高，早衰，智力缺陷等症状，然而这些突变体的致病机制并不清楚，对于此类突变造成的自闭症的治疗也没有特效药。鉴于H1.4是重要的染色质结构调控蛋白，因此从H1.4移码突变对染色质结构的影响入手，阐释H1.4可能的致病机制是十分必要的。但是目前国内外市场上均没有H1.4移码突变蛋白检测的抗体，大大限制了H1.4致病机制的研究以及患者的诊断，因此，探索和挖掘能够识别H1.4移码突变的特异性检测抗体在自闭症患者的诊断或辅助诊断领域，以及相关疾病的靶向药物开发领域，都具有广泛的应用前景和重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何快速、灵敏、特异地检测H1.4移码突变蛋白以及如何诊断或辅助诊断H1.4移码突变蛋白相关疾病。所要解决的技术问题不限于如所描述的技术主题，本领域技术人员通过以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技术主题。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了特异性结合H1.4移码突变蛋白的单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.1的第45-52位、SEQ ID No.1的第70-77位和SEQ ID No.1的第116-125位的三个互补决定区；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.2的第46-56位、SEQ ID No.2的第74-76位和SEQ ID No.2的第113-121位的三个互补决定区。其中：

重链可变区CDR1的氨基酸序列是SEQ ID No.1的第45-52位；

重链可变区CDR2的氨基酸序列是SEQ ID No.1的第70-77位；

重链可变区CDR3的氨基酸序列是SEQ ID No.1的第116-125位；

轻链可变区CDR1的氨基酸序列是SEQ ID No.2的第46-56位；