[发明专利]一种基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法

权利要求书

1.一种基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)采集茄子单倍体植株枝条，将其放入塑料袋中包好，再放入4℃冰箱中保存10天，取出后将其基部浸入多菌灵溶液；

(2)取步骤(1)中低温处理后的枝条用水冲洗后，将基部剪成45度斜面，浸入吲哚-3-丁酸溶液中，再插入基质中；

(3)将步骤(2)中插入基质中的枝条用塑料薄膜密封后，放入光照培养箱中进行培养，15～20天后可得到成活的茄子扦插苗；

(4)将扦插成活的植株，培养至开花现蕾，进行多次重复授粉自交并测定花粉活力，待自交种果成熟后，采收其中的成熟的种子；

(5)将所得的种子播种，当种子萌发出苗后，统计出苗率，测定萌发的种苗细胞中DNA含量并确定其倍性；

(6)将种子萌发的二倍体植株进行自交繁殖。

2.根据权利要求1所述的基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的单倍体茄子植株枝条的采集方法为：当单倍体茄子植株发育到四门斗开花时，将木质化程度较高的枝条，从顶端向下保留10cm以上，从下部剪下枝条。

3.根据权利要求1所述的基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的多菌灵溶液由有效成分含量为50wt％的多菌灵可湿性粉剂与水按照1:500～800的质量比稀释得到；将基部浸入多菌灵溶液，浸泡时间为0.5～4h，优选0.5～2h。

4.根据权利要求1所述的基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的吲哚-3-丁酸溶液的浓度为500～1000ppm，枝条基部切面在吲哚-3-丁酸溶液中的浸泡时间为10s～20min；所述的基质为蛭石或由蛭石、草灰和珍珠岩以5：4：1的体积比混合而成，厚度不小于10cm，浇透但不积水；枝条插入基质的深度为3～4cm，倾斜角度为30度，株行距为8cm。

5.根据权利要求1所述的基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的光照培养的温度为24～26℃，光周期为12～16h，暗周期为8～12h，光照强度为1000～1500lx；塑料薄膜密封后前两周内不打开薄膜，两周后可打开薄膜，拔除未生根枝条并浇水后，重新盖好薄膜。

6.根据权利要求1所述的基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的授粉自交过程为：授粉时间在上午8点到10点且天气良好；授粉前用经过酒精消毒的镊子将当天即将开放的花蕾的花瓣拨开，露出柱头，采取开放的花朵的花药，用尖镊子挑开花药囊，再将镊子沿着花药底端向花药散粉孔端平推收集花粉，将镊子前端收集到的花粉轻轻沾到柱头上，授粉后用铝环固定在花蕾末端并扎紧；为获得更多的自交种子，采集多个花药中的花粉给1个花蕾的柱头授粉。

7.根据权利要求1所述的基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，步骤(4)中，测定花粉活力采用医用碘伏溶液染色法。

8.根据权利要求1所述的基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，步骤(5)中，种子播种前先晒种2h，然后播种到穴盘中，浇透水，顶上覆盖塑料薄膜保湿，14天后部分种子发芽，揭掉薄膜。

9.根据权利要求1所述的基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，步骤(5)中，测定细胞中DNA含量采用流式细胞仪进行鉴定。

10.根据权利要求1所述的基于提高花粉活力的茄子单倍体植株有性繁殖加倍方法，其特征在于，步骤(6)中，自交繁殖的步骤与步骤(4)的方法相同。