[发明专利]一种检测抗过氧化物还原酶-1-IgG抗体的试剂盒有效
申请号: | 202110743523.5 | 申请日: | 2021-07-01 |
公开(公告)号: | CN113447658B | 公开(公告)日: | 2022-04-19 |
发明(设计)人: | 叶青;毛建华;田丹丹 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/58;G01N33/573;G01N33/543 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 赵杭丽 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 过氧化物 还原酶 igg 抗体 试剂盒 | ||
1. 一种过氧化物还原酶-1抗原蛋白在制备用于诊断自身免疫性肾病综合征的检测试剂盒中的应用,其特征在于,所述试剂盒由抗原蛋白peroxiredoxin-1、固相载体、标记抗体、抗原稀释液、样品稀释缓冲液、抗体稀释液、底物显色剂、洗涤液、标准品、阳性质控品、阴性质控品组成;所述抗原蛋白peroxiredoxin-1的序列如SEQ ID:1所示;所述标记抗体为酶标记、化学发光剂标记或生物素标记的二抗;所述标准品和阳性质控品为重组人抗标签肽免疫球蛋白G或其片段,或从血清中提取抗peroxiredoxin-1-IgG抗体作为阳性质控品和标准品,健康体检者血清为阴性质控品。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的抗原蛋白peroxiredoxin-1上带有标签肽,所述的标签肽为:His标签、硫氧还蛋白、GST标签、麦芽糖结合蛋白、谷胱甘肽转移酶的SA标签、c-Myc标签、Flag标签或生物素标签。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述抗原蛋白peroxiredoxin-1经镍柱亲和层析、分子筛层析、凝胶过滤层析、离子交换柱层析、疏水柱纯化。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述抗原蛋白peroxiredoxin-1固定于固相载体上,所述固相载体选用尼龙膜、硝酸纤维素膜、聚苯乙烯微孔板、离子交换树脂、磁微粒。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,利用物理吸附或共价键结合或化学结合将peroxiredoxin-1抗原蛋白通过直接的方式固定于固相载体上。
6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述底物显色剂为TMB、过氧化氢、4-MUP、AMPPD、BCIP;所述抗原稀释液为含有163mM NaCl、1% TritonX-100的1x PBS pH7.4;所述样品稀释缓冲液为含有10% BSA的0.01M PBS pH7.4;所述抗体稀释液为含有1M D-glucose、2% 甘油、0.35% Tween20的0.01M PBS pH7.4;所述洗涤液为:含有163mM NaCl、10% 甘油、1% TritonX-100的1x PBS pH7.4。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江大学,未经浙江大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110743523.5/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。