[发明专利]一种用于检测诺氟沙星的试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种用于检测诺氟沙星的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

(1)诺氟沙星-生物素标记物；

(2)诺氟沙星多克隆抗体；所述诺氟沙星多克隆抗体包被于多孔板上；

(3)修饰有链霉亲和素的碱性磷酸酶；

(4)金纳米粒子；所述金纳米粒子包括连接有叠氮基的金纳米粒子和连接有炔基的金纳米粒子，所述金纳米粒子用于检测一价铜离子；

(5)抗坏血酸磷酸；

(6)硫酸铜溶液；

(7)铜离子探针；所述铜离子探针用于检测二价铜离子；

所述诺氟沙星-生物素标记物用于与所述诺氟沙星多克隆抗体结合，且用于与所述修饰有链霉亲和素的碱性磷酸酶结合；

所述修饰有链霉亲和素的碱性磷酸酶用于还原所述抗坏血酸磷酸为抗坏血酸，所述抗坏血酸用于将所述硫酸铜溶液中的二价铜离子还原为一价铜离子。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述金纳米粒子的直径为13～17nm；

优选的，所述连接有叠氮基的金纳米粒子和所述连接有炔基的金纳米粒子的摩尔比为1：1；

更优选的，所述金纳米粒子的浓度为0.5～2OD。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述诺氟沙星-生物素标记物中，每1mg诺氟沙星上标记有生物素0.02～0.06mg；优选为0.04mg；

优选的，所述诺氟沙星-生物素标记物的浓度为0.6～1mg/mL，优选为0.8mg/mL；

更优选的，所述诺氟沙星-生物素标记物保存于甲醇中。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述多孔板上诺氟沙星多克隆抗体包被量为50～200μg/孔，优选为100μg/孔。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，抗坏血酸磷酸的浓度为1～3mM，优选2mM。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，硫酸铜溶液的浓度为1～3mM，优选为2mM；

优选的，铜离子探针的浓度为10～30μM，优选为20μM，保存于pH＝7.2的Tris-HCl：CH₃CN体积比为1:1的混合溶剂中。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还含有诺氟沙星标准品；

优选的，所述诺氟沙星标准品的浓度为10^-6pg/mL～10⁷pg/mL；

更优选的，所述诺氟沙星标准品采用稀释液配制得到，所述稀释液为含有体积百分比为10％甲醇的1X PBS缓冲液。

8.根据权利要求1～7任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述铜离子探针用于输出荧光信号；所述金纳米粒子用于输出可视化信号。