[发明专利]检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法及试剂盒在审
| 申请号: | 202110729405.9 | 申请日: | 2021-06-29 |
| 公开(公告)号: | CN113514455A | 公开(公告)日: | 2021-10-19 |
| 发明(设计)人: | 邹刚军;谭芷晴;卢智俊 | 申请(专利权)人: | 广州朗坤生物科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
| 代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 胡辉 |
| 地址: | 510170 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 检测 上皮组织 脱落 细胞 表面 叶酸 受体 表达 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.制备包含上皮组织脱落细胞的细胞悬液;
S2.滴加细胞悬液至装载叶酸受体介导的特殊染色液(FRD染色液)的反应试管中;
S3.密封反应试管,颠倒摇晃试管中的混合液体;
S4.静置等待反应试管壁上包含上皮组织脱落细胞的挂壁液体显蓝色或出现蓝色颗粒。
2.根据权利要求1所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,所述步骤S1中,包括以下步骤:S1-1.用一次性使用采样工具进行上皮组织脱落细胞采样,得到细胞样本;优选地,采样工具为采样刷或拭子。
3.根据权利要求2所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,所述步骤S1中,包括以下步骤:S1-2.往所述细胞样本中添加细胞保存液,或将所述细胞样本添加至细胞保存液中,并将包含细胞样本的保存液瓶(管)放入振荡器中振荡3-15min,吸取1-10ml所述包含细胞样本的细胞保存液至离心管中,设置800-1500g离心力,离心3-15min,缓慢倒掉上清液,取细胞样本沉淀部分留用。
4.根据权利要求3所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,所述步骤S1中,包括以下步骤:S1-3.吸取PBS缓冲液1-5ml至含有所述细胞样本沉淀部分的离心管,用吸管吹吸或用漩涡混匀器将离心管底部的细胞打散,从而制成所述细胞悬液。
5.根据权利要求1所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,所述步骤S2.中,将叶酸受体介导的特殊染色液(FRD染色液)试剂瓶颠倒混匀3-30s后待用。
6.根据权利要求1所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,所述步骤S2.中,所述叶酸受体介导的特殊染色液(FRD染色液)用量为1-3ml,所述细胞悬液用量为2-10滴。
7.根据权利要求1所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,所述步骤S3.中,所述反应试管密封后静置30-120s,然后颠倒摇晃反应试管5-10下。
8.根据权利要求1所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,所述步骤S4.中,静置时间为5-30min。
9.根据权利要求1所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,所述反应试管材质为塑料、玻璃或可供含脱落细胞的液体挂壁的材料。
10.根据权利要求1~9任一所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法,其特征在于,所述上皮组织脱落细胞为浆膜腔积液脱落细胞、子宫颈及阴道脱落细胞、呼吸系统脱落细胞、脑脊液细胞及脱落细胞、消化系统脱落细胞、泌尿系统脱落细胞中的一种或两种以上;优选地,所述上皮组织脱落细胞为子宫颈及阴道脱落细胞。
11.一种根据权利要求1~10任一所述的检测上皮组织脱落细胞表面叶酸受体表达的方法所设计的试剂盒,其特征在于,包括采样工具、细胞保存液试剂瓶、叶酸受体介导的特殊染色液(FRD染色液)试剂瓶、可密封的反应试管以及一次性使用吸管的组合。
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