[发明专利]一种有机酸的分离检测方法

说明书

本发明提供了一种有机酸的分离和/或检测方法，所述方法包括采用高效液相色谱法对含有有机酸的样品分离和/或检测，所述高效液相色谱法使用的流动相包括：三氟乙酸水溶液和高氯酸钠。相比于现有技术，其可将门冬氨酸、L‑酒石酸和内消旋酒石酸两两分离，操作过程简单，准确性高，可实现三种物质的定性和定量分析；本发明的方法还特别适合于门冬氨酸帕瑞肽注射液的质量检测，利用高效液相色谱方法既可以确定酒石酸的类型，又可以对门冬氨酸、L‑酒石酸和内消旋酒石酸任意一种物质进行含量测定。

技术领域

本发明涉及药物分析检测领域，具体涉及一种有机酸的分离和/或检测方法，特别的涉及适用于门冬氨酸帕瑞肽注射液的分析检测方法。

背景技术

酒石酸(tartaric acid)，即，2,3-二羟基丁二酸，其具有多种用途，如其是葡萄酒中主要的有机酸之一；其还可以作为食品中添加的抗氧化剂﹐可以使食物具有酸味；其还可作为饮料添加剂；其还可作为药用辅料。然而，酒石酸分子中含有两个相同的手性碳原子，存在三种立体异构体：D-酒石酸、L-酒石酸和内消旋酒石酸。在一些应用场景尤其是作为药用辅料时，需要对其具体构型进行确认、控制含量，以严格控制药物质量，而现有技术中，尚未见到对于门冬氨酸、L-酒石酸和内消旋酒石酸分离的有效方案。

CN109738560A公开了一种测定酒石酸光学异构体含量的方法，该方法将待测酒石酸进行高效液相色谱检测，所述高效液相色谱检测是通过结合紫外检测器的高效液相色谱仪进行的，基于高效液相色谱检测结果，确定所述待测酒石酸中L(+)-酒石酸和D(-)-酒石酸的含量，然而，所述待测酒石酸预先需经过衍生化处理，操作复杂，准确度差，且无法对内消旋酒石酸进行分离检测。

从前述现有技术可见，对于门冬氨酸、L-酒石酸和内消旋酒石酸直接进行分析和检测的方法并不存在。

因此，有针对性的提供一种对门冬氨酸、L-酒石酸和内消旋酒石酸中任意两种分离检测方法，是亟待解决的技术问题。

发明内容

针对现有技术中缺少针对门冬氨酸、L-酒石酸和内消旋酒石酸三种有机酸中的任意两种的分离和检测方法，尤其是L-酒石酸和内消旋酒石酸的分离检测方法，更缺少适合门冬氨酸帕瑞肽注射液的分析检测方法，由此，在本发明的第一方面，本发明提供一种有机酸的分离和/或检测方法，所述方法包括采用高效液相色谱法对含有有机酸的样品分离和/或检测，所述高效液相色谱法使用的流动相包括：三氟乙酸水溶液和高氯酸钠，所述含有有机酸的样品包括门冬氨酸、L-酒石酸和内消旋酒石酸中的至少一种。

进一步地，所述的含有有机酸的样品包括门冬氨酸、L-酒石酸和内消旋酒石酸中的至少两种；优选地，所述的含有有机酸的样品包括门冬氨酸、L-酒石酸和内消旋酒石酸。

进一步地，所述高效液相色谱法所得色谱图中，L-酒石酸和内消旋酒石酸对应的色谱峰之间的分离度大于1.5。

优选地，所述高效液相色谱法所得色谱图中，门冬氨酸、L-酒石酸和内消旋酒石酸对应的色谱峰相邻峰之间的分离度均大于1.5。

进一步地，所述流动相中三氟乙酸水溶液的浓度为0.05-0.15％(v/v)，优选为0.1％(v/v)，所述高氯酸钠的浓度为45-150mM，优选为50-140mM。

更进一步地，所述高效液相色谱法采用的色谱柱为C18色谱柱；优选地，所述色谱柱为GL Inertsil ODS-3柱。

更进一步地，所述高效液相色谱法采用的柱温为25-35℃。

更进一步地，所述高效液相色谱法的检测波长为200-210nm，优选为203-207nm。

更进一步地，所述高效液相色谱法流动相的流速为0.8-1.2ml/min。

任选地，所述高效液相色谱法采用的洗脱方式为等度洗脱。