[发明专利]一种微升级单细胞液滴生成和培养方法以及装置在审

专利信息
申请号: 202110706877.2 申请日: 2021-06-24
公开(公告)号: CN115521882A 公开(公告)日: 2022-12-27
发明(设计)人: 张翀;剪兴金;郭肖杰;邢新会 申请(专利权)人: 清华大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N1/18;C12N1/16;C12N1/14;C12M1/00;C12M1/38;C12M1/34;C12M1/26;B01L3/00;C12R1/19;C12R1/15;C12R1/25;C12R1/84;C12R1/865;C1
代理公司: 北京彩和律师事务所 11688 代理人: 闫桑田
地址: 100084*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 微升 细胞液 生成 培养 方法 以及 装置
【权利要求书】:

1.一种微升级单细胞液滴生成和培养方法,其特征在于,包括如下步骤:

进样:将油相和水相输入微流控芯片内;

制备液滴:在所述微流控芯片内油相将水相分割成多个初始液滴,所述初始液滴包含有微升级的单细胞液滴;

培养:培养所述初始液滴,得到培养后的液滴。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述微流控芯片具有一条水相流道和两条油相流道,且水相流道位于两条油相之间,且相互连通,在制备液滴过程中,两条油相流道中油相将水相挤压成所述初始液滴。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,为了生成微升级的单细胞液滴,所述水相在所述水相通道内的流速为abμL/s,每条油相通道中的油相流速为0.5abcμL/s,其中,a为所述初始液滴生成的速度,单位为个/s,b为所述初始液滴的体积,单位为μL;c为两个初始液滴之间的间隔和单个初始液滴的长度的比值。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述微流控芯片具有相互连通的一条水相流道和一条油相流道,在制备液滴过程中,所述油相流道中油相将水相切割成所述初始液滴。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,为了生成微升级的单细胞液滴,所述水相在所述水相流道内的流速为abμL/s,所述油相在所述油相流道内的流速为abcμL/s,其中,a为所述初始液滴生成的速度,单位为个/s,b为所述初始液滴的体积,单位为μL;c为两个初始液滴之间的间隔和单个初始液滴的长度的比值。

6.根据权利要求2-5任一项所述的方法,其特征在于,所述水相流道以及油相流道的横截面积均为0.1mm2-3 mm2,优选为0.25mm2-1 mm2

优选地,所述水相为菌液,所述菌液中的菌选自大肠杆菌、谷氨酸棒杆菌、植物乳杆菌、酿酒酵母、毕赤酵母、霉菌、放线菌中的一种;

优选地,所述培养后的液滴通过检测确认所述培养后的液滴中的成分。

7.一种微升级单细胞液滴生成和培养装置,其特征在于,包括:进样系统、微流控芯片以及液滴培养系统,其中,

所述进样系统,用于向微流控芯片进样水相和油相;

在所述微流控芯片内油相将水相分割成多个初始液滴,所述初始液滴包含有微升级的单细胞液滴;

所述液滴培养系统,用于培养所述初始液滴。

8.根据权利要求7所述的装置,其特征在于,所述进样系统分别与所述微流控芯片以及所述液滴培养系统连通;当所述初始液滴在所述液滴培养系统内培养结束后,所述进样系统控制所述液滴培养系统内的压强,将所述培养后的液滴驱出所述液滴培养系统。

9.根据权利要求7所述的装置,其特征在于,所述进样系统包括储油容器、第一进样系统和第二进样系统,所述储油容器分别与所述第一进样系统以及所述第二进样系统连通,所述第一进样系统用于向所述微流控芯片输入油相,所述第二进样系统用于向所述微流控芯片输入水相;

优选地,所述第一进样系统包括第一动力源,所述第一动力源分别与储油容器以及微流控芯片连通;所述储油容器中的油相通过所述第一动力源进入所述微流控芯片中;

优选地,所述第二进样系统包括第二动力源以及进样瓶,所述第二动力源分别与储油容器和进样瓶连接,所述进样瓶还与微流控芯片连接;所述储油容器中的油相通过第二动力源进入所述进样瓶内,所述进样瓶内的水相被所述油相挤压出所述进样瓶,并进入所述微流控芯片中。

10.根据权利要求9所述的装置,其特征在于,所述培养装置还包括液滴检测系统,其用于检测所述微流控芯片内的未培养的初始液滴或培养后的液滴。

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