[发明专利]一种微升级单细胞液滴生成和培养方法以及装置在审
申请号: | 202110706877.2 | 申请日: | 2021-06-24 |
公开(公告)号: | CN115521882A | 公开(公告)日: | 2022-12-27 |
发明(设计)人: | 张翀;剪兴金;郭肖杰;邢新会 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/18;C12N1/16;C12N1/14;C12M1/00;C12M1/38;C12M1/34;C12M1/26;B01L3/00;C12R1/19;C12R1/15;C12R1/25;C12R1/84;C12R1/865;C1 |
代理公司: | 北京彩和律师事务所 11688 | 代理人: | 闫桑田 |
地址: | 100084*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微升 细胞液 生成 培养 方法 以及 装置 | ||
1.一种微升级单细胞液滴生成和培养方法,其特征在于,包括如下步骤:
进样:将油相和水相输入微流控芯片内;
制备液滴:在所述微流控芯片内油相将水相分割成多个初始液滴,所述初始液滴包含有微升级的单细胞液滴;
培养:培养所述初始液滴,得到培养后的液滴。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述微流控芯片具有一条水相流道和两条油相流道,且水相流道位于两条油相之间,且相互连通,在制备液滴过程中,两条油相流道中油相将水相挤压成所述初始液滴。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,为了生成微升级的单细胞液滴,所述水相在所述水相通道内的流速为abμL/s,每条油相通道中的油相流速为0.5abcμL/s,其中,a为所述初始液滴生成的速度,单位为个/s,b为所述初始液滴的体积,单位为μL;c为两个初始液滴之间的间隔和单个初始液滴的长度的比值。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述微流控芯片具有相互连通的一条水相流道和一条油相流道,在制备液滴过程中,所述油相流道中油相将水相切割成所述初始液滴。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,为了生成微升级的单细胞液滴,所述水相在所述水相流道内的流速为abμL/s,所述油相在所述油相流道内的流速为abcμL/s,其中,a为所述初始液滴生成的速度,单位为个/s,b为所述初始液滴的体积,单位为μL;c为两个初始液滴之间的间隔和单个初始液滴的长度的比值。
6.根据权利要求2-5任一项所述的方法,其特征在于,所述水相流道以及油相流道的横截面积均为0.1mm2-3 mm2,优选为0.25mm2-1 mm2;
优选地,所述水相为菌液,所述菌液中的菌选自大肠杆菌、谷氨酸棒杆菌、植物乳杆菌、酿酒酵母、毕赤酵母、霉菌、放线菌中的一种;
优选地,所述培养后的液滴通过检测确认所述培养后的液滴中的成分。
7.一种微升级单细胞液滴生成和培养装置,其特征在于,包括:进样系统、微流控芯片以及液滴培养系统,其中,
所述进样系统,用于向微流控芯片进样水相和油相;
在所述微流控芯片内油相将水相分割成多个初始液滴,所述初始液滴包含有微升级的单细胞液滴;
所述液滴培养系统,用于培养所述初始液滴。
8.根据权利要求7所述的装置,其特征在于,所述进样系统分别与所述微流控芯片以及所述液滴培养系统连通;当所述初始液滴在所述液滴培养系统内培养结束后,所述进样系统控制所述液滴培养系统内的压强,将所述培养后的液滴驱出所述液滴培养系统。
9.根据权利要求7所述的装置,其特征在于,所述进样系统包括储油容器、第一进样系统和第二进样系统,所述储油容器分别与所述第一进样系统以及所述第二进样系统连通,所述第一进样系统用于向所述微流控芯片输入油相,所述第二进样系统用于向所述微流控芯片输入水相;
优选地,所述第一进样系统包括第一动力源,所述第一动力源分别与储油容器以及微流控芯片连通;所述储油容器中的油相通过所述第一动力源进入所述微流控芯片中;
优选地,所述第二进样系统包括第二动力源以及进样瓶,所述第二动力源分别与储油容器和进样瓶连接,所述进样瓶还与微流控芯片连接;所述储油容器中的油相通过第二动力源进入所述进样瓶内,所述进样瓶内的水相被所述油相挤压出所述进样瓶,并进入所述微流控芯片中。
10.根据权利要求9所述的装置,其特征在于,所述培养装置还包括液滴检测系统,其用于检测所述微流控芯片内的未培养的初始液滴或培养后的液滴。
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