[发明专利]一种基于凝血分析仪用试剂的双对数定标方法

说明书

本发明公开了一种基于凝血分析仪用试剂的双对数定标方法，该方法包括：使用标准被测成分浓度的定标样本与凝血试剂反应，根据标准定标样本提供的参考时间得出对应的凝固曲线及凝固检测比例点，再使用不同被测成分浓度的定标样本进行多次实验，根据标准凝固曲线及凝固检测比例点，检测得到不同被测成分浓度定标样本对应的凝固时间，根据被测成分浓度的对数和该成分与凝血试剂反应凝固时间的对数呈线性关系，计算得到定标曲线。本发明基于凝血分析仪用试剂的双对数定标方法具有灵活准确、适用性强的优点。

技术领域

本发明涉及凝血检测技术领域，特别涉及一种基于凝血分析仪用试剂的双对数定标方法。

背景技术

光学凝固法是目前常用的凝血检测方法，光学凝固法运用了光的散射原理，在试杯两侧呈90度设置光源和接收器，探测试杯内液体的吸光度变化。试杯内反应物凝固时散射角发生变化，因此吸光度与反应物凝固呈度具有相关性。光信号被接收并转换成电信号，再进行放大处理和计算。

光学凝固法根据被测成分和试剂反应的凝固呈度确定凝固时间，该反应过程在凝血分析仪中呈现S形凝固反应曲线，具有起点、凝固点、终点三个特征点。光学凝固法检测的凝血项目通常有凝血酶原时间PT、凝血酶时间TT、活化部分凝血活酶时间APTT、纤维蛋白原浓度FIB。PT、TT、APTT使用凝固时间作为指标，FIB使用浓度作为指标，为临床诊断提供参考依据。

其中，纤维蛋白原(FIB)的浓度与凝固时间具有相关性。但普通、单一的计算方法，其相关性较差，难以做出准确有效的定标。因此，所设计的方法必须具有更强的适应性，并对于不同被测成分浓度样本保持定标的有效性和准确性。

发明内容

本发明要解决的技术问题的是提供一种灵活准确、适用性强的基于凝血分析仪用试剂的双对数定标方法。

为了解决上述问题，本发明提供了一种基于凝血分析仪用试剂的双对数定标方法，其包括：

使用标准被测成分浓度的定标样本与凝血试剂反应，根据标准定标样本提供的参考时间得出对应的凝固曲线及凝固检测比例点；再使用不同被测成分浓度的定标样本进行多次实验，根据标准凝固曲线及凝固检测比例点，检测得到不同被测成分浓度的定标样本对应的凝固时间；根据被测成分浓度的对数和该成分与凝血试剂反应的凝固时间的对数呈线性关系，计算得到定标曲线。

作为本发明的进一步改进，采用多点定标，对不同定标点使用不同被测成分浓度的定标样本，并对同一定标点进行多次实验取平均值，作为该定标点的凝固时间。

作为本发明的进一步改进，凝固检测比例点的计算方法如下：

根据标准定标样本的实验得出的反应曲线具有反应起点(ti，di)和终点(te，de)，根据定标样本提供的参考时间tr，可在反应曲线上确定对应参考时间点的信号值dr，得出凝固检测比例点＝(dr-di)/(de-di)。

作为本发明的进一步改进，不同被测成分浓度定标样本的凝固时间的计算方法如下：

使用不同测成分浓度定标样与凝血试剂反应，得出不同被测成分浓度定标样本反应曲线的反应起点(ti，di)和终点(te，de)，根据凝固检测比例点计算信号值d0＝凝固检测比例点*(de-di)+di，根据d0，可在反应曲线上确定对应的凝固时间t0。

作为本发明的进一步改进，被测成分浓度与凝血试剂的反应起点判定方法如下：

实验开始后，连续采集多个吸光度数据并计算平均值davg，当此后采集的吸光度数据di≥davg+Δd时，判定反应开始；其中，Δd为设定值。

作为本发明的进一步改进，在试杯中加入反应物，待液体静止后，连续采集15个被测成分吸光度数据并计算平均值davg。

作为本发明的进一步改进，Δd＝0.32V。