[发明专利]一种抗原蛋白、其单克隆抗体或多克隆抗体及应用

说明书

本发明实施例涉及一种抗原蛋白、其单克隆抗体或多克隆抗体及应用，该抗原蛋白由N段到C段包括通过连接序列依次相连的鲤疱疹病毒2型ORF153蛋白的第45‑56位氨基酸、第76‑95位氨基酸、124‑145位氨基酸、176‑281位氨基酸。该去除原始ORF153蛋白中疏水性区域表达的抗原蛋白，其抗原性分析结果显示优于原始ORF153蛋白，并且利用该抗原蛋白获得的单克隆抗体或多克隆抗体均可用于鲤疱疹病毒2型的检测。

技术领域

本发明涉及免疫检测领域，具体涉及一种抗原蛋白、其单克隆抗体或多克隆抗体及应用。

背景技术

鲤疱疹病毒2型(Cyprinid Herpesvirus 2，CyHV-2)，又称金鱼造血器官坏死病毒(goldfish haematopoietic necrosis virus，GFHNV)，)是一种引起金鱼和鲫造血器官坏死病的高致病性病毒，严重危害金鱼、鲫养殖业。该病毒自1992年在日本首次发现后，迅速蔓延至亚洲、北美洲、大洋洲、欧洲，在我国鲫主养区大规模暴发流行，给金鱼、鲫鱼养殖产业造成了严重的经济损失。

该病毒是第二个分离自鲤科鱼类的疱疹病毒，按照国际病毒系统分类委员会的系统命名规则，将该病毒命名为鲤疱疹病毒2型(CyHV-2)，属于疱疹病毒目、异样疱疹病毒科、鲤科疱疹病毒属，是我国危害极大的鲫造血器官坏死病的病原。CyHV-2是具有囊膜的双链DNA病毒，病毒颗粒直径为170～220nm，基因全长约为290kbp，G基因和C基因所占比例为51.7％。基因组共编码154个开放阅读框(Open reading frame，ORF)，其中有4个末端重复序列，整个基因组还有两个无编码功能的碎片基因。

Davision等应用先进的生物信息技术对三种鲤科疱疹病毒能够编码的蛋白进行预测分析。结果显示，CyHV-2基因组含有约150个编码功能蛋白的ORFs，包含一些在三种鲤科疱疹病毒基因组内共有的保守ORFs：如ORF33编码DNA包装末端酶亚基；ORF71编码DNA解旋酶亚基；ORF72编码病毒衣壳三联体亚基；ORF78编码衣壳成熟蛋白酶；ORF79编码DNA聚合酶亚基等。其余的CyHV-2ORFs中只有少数的功能得到确认，如ORF25、ORF25C和ORF25D能够编码膜蛋白；ORF104编码类激酶蛋白，该蛋白在病毒感染鱼体过程中起重要的作用。其他的ORF功能还有待进一步的研究。

本发明选择的ORF153以ORF153家族的形式存在于CyHV-2基因组中，预测ORF153蛋白家族为3型膜蛋白，虽然蛋白功能分析显示ORF153编码蛋白为膜蛋白，但未见具体的验证，其深入的功能定位还不清楚，更多相关研究仍有待开展。

目前已有很多CyHV-2的检测诊断方法，但在实际广泛应用中主要还是基于分子的检测技术，血清学诊断并没有得到广泛的应用。尤其是对于潜伏感染的宿主来说，基于分子的检测并不能判断宿主体内是否存在病毒，而血清学诊断技术能弥补这个缺陷。基于免疫学的抗原检测方法的建立，需要有能特异性识别CyHV-2的抗体。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

发明目的

本发明的目的在于提供一种抗原蛋白、其单克隆抗体或多克隆抗体及其在制备检测鲤疱疹病毒2型的试剂盒中的应用。该去除原始ORF153蛋白中疏水性区域的抗原蛋白，其抗原性分析结果显示优于原始ORF153蛋白，并且利用该抗原蛋白获得的单克隆抗体或多克隆抗体均可用于鲤疱疹病毒2型的检测。

解决方案