[发明专利]一种生物样品中前列腺素类物质的检测方法有效
申请号: | 202110692340.5 | 申请日: | 2021-06-22 |
公开(公告)号: | CN113358791B | 公开(公告)日: | 2022-09-30 |
发明(设计)人: | 顾景凯;孙冬;孟祥骏;宋诗文 | 申请(专利权)人: | 北京现代药物代谢研究院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86 |
代理公司: | 北京国林贸知识产权代理有限公司 11001 | 代理人: | 李瑾;李连生 |
地址: | 100000 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 样品 前列腺素 物质 检测 方法 | ||
1.一种生物样品中前列腺素类物质的检测方法,其特征在于:先通过化学衍生化方法将生物样品中前列腺素类物质等量转化成胺甲基芳磺酸衍生物,再通过液相色谱-质谱联机检测;检测时选择芳磺酸衍生物负离子[M-H]-和其高特异性碎片离子[M-H2O-C15Residue]-或者选择芳磺酸衍生物负离子[M-H]-和报告离子作为定量离子对进行定量;所述M指芳磺酸衍生物;所述C15Residue指系列前列腺素C14-C15之间碳碳单键断裂后C15一侧残基;所述报告离子指前列腺素芳磺酸衍生物裂解时产生的芳磺酸碎片离子;
胺甲基芳磺酸衍生化试剂通式为H2N-CH2-Ar-SO3H,其中Ar为苯环或稠环芳烃;所述稠环芳烃包括芴、苊、萘、蒽、荧蒽、苯并蒽、菲、芘、苯并芘。
2.根据权利要求1所述的生物样品中前列腺素类物质的检测方法,其特征在于:胺甲基芳磺酸衍生化试剂为4-(胺甲基)苯磺酸或5-(胺甲基)萘-2-磺酸。
3.根据权利要求2所述的生物样品中前列腺素类物质的检测方法,其特征在于:对于4-(胺甲基)苯磺酸衍生的前列腺素类物质选择的报告离子为[C7H6NO3S]-或[C7H6O3S]·-;对于5-(胺甲基)萘-2-磺酸衍生的前列腺素类物质选择的报告离子为[C11H8NO3S]-或[C11H8O3S]·-。
4.根据权利要求1所述的生物样品中前列腺素类物质的检测方法,其特征在于:采用化学衍生化方法对生物样品中前列腺素类待测物进行衍生化处理时,衍生化条件为典型肽偶联反应条件:有机碱为N,N-二异丙基乙基胺或三乙胺;偶联试剂为HATU或HBTU;溶剂为乙腈水混合液,室温反应。
5.根据权利要求1所述的生物样品中前列腺素类物质的检测方法,其特征在于:色谱条件为:高效液相色谱;反相色谱柱;乙腈/水流动相;梯度洗脱;质谱条件为:多重四极杆型串联质谱仪,ESI离子化源,选择性加装离子淌度;负离子检测模式。
6.根据权利要求1所述的生物样品中前列腺素类物质的检测方法,其特征在于:所述的生物样品为血浆、组织液、尿液。
7.根据权利要求1所述的生物样品中前列腺素类物质的检测方法,其特征在于:所述前列腺素类物质包括系列前列腺素及前列腺素类似物;所述系列前列腺素包括PGE1、PGE2、PGD2、PGI2,所述前列腺素类似物包括利马前列素、贝前列素。
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