[发明专利]一种微生物快速冻干保存的方法有效
申请号: | 202110672936.9 | 申请日: | 2021-06-17 |
公开(公告)号: | CN113201459B | 公开(公告)日: | 2023-06-16 |
发明(设计)人: | 刘雨薇;陈庆国;刘梅;汪涛;竺柏康 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12N1/04 | 分类号: | C12N1/04;C12N1/20;C12R1/25;C12R1/225;C12R1/245 |
代理公司: | 北京国翰知识产权代理事务所(普通合伙) 11696 | 代理人: | 叶帅东 |
地址: | 316002 浙江省舟*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 速冻 保存 方法 | ||
本发明涉及微生物保存技术领域,特别是关于一种微生物快速冻干保存的方法,包括:微生物活化、培养、富集得菌含量1×10supgt;8/supgt;cfu/mL~1×10supgt;9/supgt;cfu/mL的菌悬液;在菌悬液中加入权利要求1~3任一项所述微生物冻干保护,混匀得混合菌液;将球霰石碳酸钙按照重量体积比1g:0.8~2mL加入至混合菌液中混匀,快速冷冻,然后干燥即得冻干粉。本发明方法操作简便,可迅速完成对微生物的冻干保存;经本申请方法冻干保存的微生物,存活率不低于90%,显著提高了微生物的保藏期,利于微生物制剂的加工、储藏及转输,此外,还有利于提高冻干产酸菌的产酸活性,相对于常规冻干保存方法有助于维持产酸菌的生物学活性。
技术领域
本发明涉及微生物保存技术领域,特别是关于一种微生物快速冻干保存的方法。
背景技术
微生物在食品健康方面的应用主要包括两个方面,其一是利用有益微生物的作用制作发酵食品,在现代发酵工程中应用较为普遍,其二则是防止有害微生物污染食品,以确保食品安全。
乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的统称。其在自然界中分布极为广泛,在工农业、食品加工业和医药产业等均具有极高的应用价值。然而,普通乳酸菌活力较弱,而且对营养成分和外界环境要求较高,长期储存下其存活率和活性会发生极速下降,严重限制了其应用。
目前多以冻干保存的方式储存乳酸菌,然而对其直接冷冻干燥时会严重影响其活性,因此多添加冻干保护剂以保护微生物活性。例如申请号CN2013103232152的发明专利以四氢嘧啶、海藻糖、脱脂乳和谷氨酸钠作为冻干保护剂,而申请号CN2018106931842的发明专利则以甘油、海藻糖、脱脂乳粉、维生素C和阿拉伯胶作为真空冷冻干燥保护剂,申请号2019106154468的发明专利则以单组份羧甲基茯苓多糖作为冻干保护对乳酸菌进行冻干保护,然而上述现有技术均存在乳酸菌存活率有不同程度的下降的缺陷,而且均未对复活的乳酸菌的产酸活性进行验证。
以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案,其并不必然属于本专利申请的现有技术,在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下,上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。
发明内容
(一)要解决的技术问题
针对现有技术存在的至少一种技术问题,本申请提供一种可显著微生物存活率的微生物冻干保护剂,成分包括茶氨酸与羟乙基多糖。本发明还提供一种有利于提高微生物存活率、提升冻干产酸菌产酸活性且操作简单的微生物快速冻干保存方法。
(二)技术方案
为解决上述技术问题或未实现上述技术目的,本发明提供如下技术方案。
一种微生物冻干保护剂,其包括重量比1:4.5~6的茶氨酸与羟乙基多糖。
茶氨酸与羟乙基多糖的重量比更优选1:5~5.5,最优选1:5.5。
羟乙基多糖选自羟乙基猴头菇多糖、羟乙基茯苓多糖或羟乙基香菇多糖的至少一种。
羟乙基多糖优选羟乙基猴头菇多糖。
微生物包括乳酸菌或酪酸菌的至少一种。
乳酸菌包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌或保加利亚乳杆菌的至少一种。
本申请所述微生物冻干保护剂可用于包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、保加利亚乳杆菌等乳酸菌菌种及酪酸菌的快速冻干保存和/或冻干粉制备,本申请所述冻干保护剂可单独应用,也能与其他常规冻干保护剂如脱脂乳、海藻酸、乳清蛋白等搭配使用,具有显著的提升冻干保存微生物的存活率的作用,相比于应用常规保护剂,微生物的存活率得到大幅提高。
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