[发明专利]一种大鲵肽-富勒烯复合物及其制备方法和应用

说明书

本发明属于复合物技术领域，特别是涉及一种大鲵肽‑富勒烯复合物及其制备方法和应用。本发明提供的大鲵肽‑富勒烯复合物为大鲵肽和水溶性富勒烯形成的结合体。水溶性富勒烯经修饰后不仅失去了对人皮肤成纤维细胞产生毒性的缺陷，还能够促进人皮肤成纤维细胞的增殖，同时还有美白的功效。将0.05～1.00mg/mL浓度的大鲵肽‑富勒烯复合物与人皮肤成纤维细胞共培养48h后，不仅没有出现细胞毒性，人皮肤成纤维细胞的存活率高达101％～355％，同时，大鲵肽‑富勒烯复合物还具有酪氨酸酶抑制率，大鲵肽‑富勒烯复合物的浓度为50mg/mL时，抑制率高达83.52％。

技术领域

本发明属于复合物技术领域，特别是涉及一种大鲵肽-富勒烯复合物及其制备方法和应用。

背景技术

富勒烯是由碳组成的中空的球形、椭球形和柱形分子的总称。富勒烯表面有大量易于与自由基反应的共价双键，因此，它可以作为体内的抗氧化剂。然而富勒烯不容于水，限制了它的应用。为了使其能被人体吸收利用，人们对富勒烯进行化学修饰使其具有水溶性。但是对现有的水溶性富勒烯的生物毒性评估表明，当水溶性富勒烯的浓度为7.5μg/mL时，水溶性富勒烯与人皮肤成纤维细胞共孵育48h以内，对人皮肤成纤维细胞产生微小毒性，当水溶性富勒烯浓度大于7.5μg/mL时，或者与人皮肤成纤维细胞共孵育时间大于48h时，水溶性富勒烯则对人皮肤成纤维细胞产生显著毒性。只有减轻水溶性富勒烯的生物毒性，才能更好地发挥富勒烯清除自由基的作用。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种大鲵肽-富勒烯复合物及其制备方法和应用。本发明提供的大鲵肽-富勒烯复合物不仅对人皮肤成纤维细胞无毒，而且还能够促进人皮肤成纤维细胞的生长，同时还具有美白的作用。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

本发明提供了一种大鲵肽-富勒烯复合物，包括大鲵肽和水溶性富勒烯。

优选的，所述大鲵肽的制备方法包括对大鲵组织匀浆依次进行首次酶解和再次酶解，得到大鲵肽；

所述首次酶解用酶为复合酶，所述再次酶解用酶为酸性蛋白酶。

优选的，所述复合酶的重量为大鲵组织匀浆的0.1％～1.0％；

所述首次酶解的温度为35℃～45℃，时间为12～48h。

优选的，所述复合酶包括酸性蛋白酶、胃蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶，以酶活力计，所述酸性蛋白酶、胃蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶活力比为：(5～8):(2～3):(2～3):(1～2)；

所述酸性蛋白酶、胃蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶活力单位均≥800000U/g。

优选的，所述再次酶解前还包括对首次酶解获得的产物进行处理获得冻干粉；所述酸性蛋白酶的重量为冻干粉的0.1％～1.0％；

所述再次酶解的温度为35℃～45℃，时间为12～48h。

优选的，所述再次酶解前还包括对首次酶解所得产物进行处理获得冻干粉，以冻干粉形式进行再次酶解。

本发明还提供了上述大鲵肽-富勒烯复合物的制备方法，包括以下步骤：

(Ⅰ)调节大鲵肽水溶液的pH值至5.00～6.00与水溶性富勒烯混合，得到半成品溶液；

(Ⅱ)将所述半成品溶液冷藏，得到成品溶液；

(Ⅲ)采用150D纳滤膜过滤所述成品溶液，得到大鲵肽-富勒烯复合物。

优选的，步骤(Ⅰ)中，所述大鲵肽水溶液液中大鲵肽与水溶性富勒烯的质量比为(1～2):(5～10)。

本发明提供了上述大鲵肽-富勒烯复合物或上述制备方法制备得到的大鲵肽-富勒烯复合物在制备美白效果产品中的应用。