[发明专利]一种调节重组蛋白羟基化水平的方法

权利要求书

1.一种调节重组蛋白羟基化水平的方法，其特征在于，包括如下步骤：在表达重组蛋白的细胞中，降低PLOD蛋白的表达或功能；其中，所述重组蛋白不为所述PLOD蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述PLOD蛋白选自PLOD1、PLOD2和PLOD3中的任意一种、两种或三种；

优选地，所述PLOD蛋白至少包括PLOD2。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法将干扰PLOD蛋白的表达或功能的抑制剂施用于表达重组蛋白的细胞中；所述抑制剂选自siRNA、shRNA、microRNA、反义核苷酸、核酶、编码负性突变体的核苷酸或表达载体、抗体、肽和小分子化合物；

优选地，所述抑制剂包括针对PLOD1、PLOD2和PLOD3中的任意一种、两种或三种的siRNA，优选至少包括针对PLOD2的siRNA。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，针对PLOD1的siRNA具有如SEQ ID NO.01所示的正义链和如SEQ ID NO.02所示的反义链；

和/或，针对PLOD2的siRNA具有如SEQ ID NO.03所示的正义链和如SEQ ID NO.04所示的反义链、具有如SEQ ID NO.05所示的正义链和如SEQ ID NO.06所示的反义链或者具有如SEQ ID NO.07所示的正义链和如SEQ ID NO.08所示的反义链；

和/或，针对PLOD3的siRNA具有如SEQ ID NO.09所示的正义链和如SEQ ID NO.10所示的反义链。

5.根据权利要求1～4任意一项所述的方法，其特征在于，所述细胞为哺乳动物细胞，优选选自CHO细胞、HEK293细胞和Vero细胞；

优选地，所述细胞为表达重组蛋白的单克隆细胞或为外源转入了重组蛋白表达载体的细胞；所述重组蛋白优选选自单克隆抗体和融合蛋白，所述融合蛋白进一步优选为Fc融合蛋白。

6.干扰PLOD蛋白的表达或功能的抑制剂，其特征在于，所述抑制剂包括针对PLOD1、PLOD2和PLOD3中的任意一种、两种或三种的siRNA，优选至少包括针对PLOD2的siRNA；

优选地，针对PLOD1的siRNA具有如SEQ ID NO.01所示的正义链和如SEQ ID NO.02所示的反义链；和/或，针对PLOD2的siRNA具有如SEQ ID NO.03所示的正义链和如SEQ ID NO.04所示的反义链、具有如SEQ ID NO.05所示的正义链和如SEQ ID NO.06所示的反义链或者具有如SEQ ID NO.07所示的正义链和如SEQ ID NO.08所示的反义链；和/或，针对PLOD3的siRNA具有如SEQ ID NO.09所示的正义链和如SEQ ID NO.10所示的反义链。

7.一种表达重组蛋白的细胞，其特征在于，所述细胞中PLOD蛋白的表达或功能被抑制；其中，所述重组蛋白不为所述PLOD蛋白；

优选地，所述PLOD蛋白选自PLOD1、PLOD2和PLOD3中的任意一种、两种或三种，优选至少包括PLOD2。

8.根据权利要求7所述的细胞，其特征在于，所述细胞中外源加入了抑制PLOD蛋白的表达或功能的抑制剂，所述抑制剂选自siRNA、shRNA、microRNA、反义核苷酸、核酶、编码负性突变体的核苷酸或表达载体、抗体、肽和小分子化合物；

优选地，所述抑制剂包括针对PLOD1、PLOD2和PLOD3中的任意一种、两种或三种的siRNA，优选至少包括针对PLOD2的siRNA。