[发明专利]一种预防和治疗龋齿的生物酶及其应用有效
申请号: | 202110656155.0 | 申请日: | 2021-06-11 |
公开(公告)号: | CN113416715B | 公开(公告)日: | 2022-06-28 |
发明(设计)人: | 谷立川;刘楠;许素娟 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12N9/00 | 分类号: | C12N9/00;C12N15/70;A61K9/00;A61K9/20;A61K9/68;A61K38/47;A61P1/02;A61P31/04 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
地址: | 266237 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 预防 治疗 龋齿 生物酶 及其 应用 | ||
1.一种预防和治疗龋齿的生物酶,其特征在于:编码所述生物酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.权利要求1所述预防和治疗龋齿的生物酶的制备方法,其特征在于:将编码所述生物酶基因的核苷酸序列SEQ ID NO.2连接表达载体pET-15b,引入组氨酸标签,然后转化E.coli BL21(DE3)并进行IPTG诱导表达,筛选出的菌体破碎后离心,上清液加到Ni-NTA 亲和层析柱上,Ni与蛋白中引入的组氨酸标签结合,将目的蛋白挂在层析柱上,然后用洗脱缓冲液将目的蛋白竞争洗脱下来,所得目的蛋白溶液通过阴离子交换层析和分子排阻层析进一步进行纯化得到所述预防和治疗龋齿的生物酶;其中,所述洗脱缓冲液的配方是:25 mMTris pH 8.0、100 mM 氯化钠、250 mM 咪唑;所述阴离子交换层析选Source 15Q HR 16/10, GE Healthcare,其所用洗脱缓冲液含为25 mM Tris pH 8.0,浓度梯度为0-1 M氯化钠;所述分子排阻层析选Superdex 200 10/300 GL, GE Healthcare,其所用缓冲液为100mM 氯化钠, 10 mM Tris pH 8.0。
3.权利要求1所述预防和治疗龋齿的生物酶在制备口腔护理产品中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述口腔护理产品是口香糖或咀嚼片。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述口香糖每千克组分的配方是:生物酶与溶菌酶按质量比为(1~50):(1~500)制成的复合物1~20g、胶基300~600g、甜味剂100~200g、香味剂10~50g、甘油20g,余量为药学上所接受的载体;其中所述甜味剂为:麦芽糖、葡萄糖、木糖醇、糖精中的一种或其几种按任意质量比的复配;香味剂为:薄荷香料、柠檬香料、玫瑰香精中的一种或其几种按任意质量比的复配。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述咀嚼片每千克组分的配方是:生物酶与溶菌酶按质量比为(1~50):(1~500)制成的复合物5~50g、甘油20g、明胶粉100~500g、甜味剂100~200g、香味剂10~50g、润滑剂50g、羧甲基纤维素50g、食用色素5g,余量为药学上所接受的载体;其中,甜味剂为:麦芽糖、葡萄糖、木糖醇、糖精中的一种或其几种按任意质量比的复配;香味剂为:薄荷香料、柠檬香料、玫瑰香精中的一种或其几种按任意质量比的复配;润滑剂为微粉硅胶。
7.根据权利要求5或6所述的应用,其特征在于,所述生物酶与溶菌酶制成的复合物中生物酶与溶菌酶质量比为1:50;所述甜味剂为:麦芽糖、葡萄糖或木糖醇;所述香味剂为:薄荷香料、柠檬香料或玫瑰香精。
8.一种预防和治疗龋齿的药物组合物,其特征在于:所述药物组合物含有权利要求1所述生物酶和溶菌酶,或者还含有药学上可接受的载体;其中生物酶与溶菌酶二者质量比为(1~50):(1~500)。
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