[发明专利]基于给予免疫原性的应激蛋白的治疗性癌症疫苗

说明书

本发明描述了一种用于制备包含肿瘤细胞应激蛋白的组合物的方法，所述方法包括以下步骤：将肿瘤细胞置于培养基中；使i)中的肿瘤细胞经历应激，结果是这些细胞响应于所述应激产生应激蛋白；获得或回收应激的肿瘤细胞和/或应激蛋白；用能够给予所述应激蛋白免疫原性的分子或过程(优选为半抗原或半抗原化过程)处理获得的所述应激的肿瘤细胞和/或应激蛋白。本发明还描述了一种药物组合物，所述药物组合物包含肿瘤细胞应激蛋白和/或含有应激蛋白的肿瘤细胞，以及药用赋形剂，这些应激蛋白被给予免疫原性，并且尤其是被半抗原化。

本申请是申请日为2014年10月15日、申请号为2014800569260、发明名称为“基于给予免疫原性的应激蛋白的治疗性癌症疫苗”的分案申请。

技术领域

本发明涉及基于应激蛋白、包括如HSP(热休克蛋白)和/或GRP(葡萄糖调节蛋白)这样的类型的伴侣蛋白或抗性机制(LRP、CTL4、PD-L1等)中涉及的其他蛋白的癌症治疗的新型治疗方法。本发明尤其涉及用于制备药物组合物或治疗性疫苗的方法、所述药物组合物或治疗性疫苗本身以及用于癌症的治疗性治疗的治疗方法。

背景技术

免疫系统基于两种防御机制，即：先天性免疫，其迅速但无特异性；以及获得性免疫，其较慢但有特异性并且具有记忆。这两种互补机制通过在细胞-介导的免疫应答期间直接地亦或在体液免疫应答期间通过活性分子(如免疫球蛋白、细胞因子等类型)的分泌动员细胞以提供抵抗内部“侵袭”的能力。

癌症的发生和发展大量地涉及免疫。根据三阶段理论(3E)，致癌作用响应于消除机制，基于双重免疫功能、旨在破坏肿瘤细胞的保护性免疫监视过程以及抗癌细胞的“选择”。三阶段理论包括被称为消除阶段的第一阶段，在该阶段期间免疫系统抵抗肿瘤增殖，引起与肿瘤相关的组织参与和环境变化(非特异性细胞(巨噬细胞、NK、sDC)的动员)，抗增殖、凋亡、血管生成抑制的分子的分泌，细胞因子的产生，CD4和CD8的动员和激活。在被称为响应于免疫系统的平衡阶段的第二阶段期间，“敏感的”肿瘤细胞被消除并且导致最具抗性的细胞的免疫选择。调动起来的抗性机制为抵抗细胞凋亡，抑制细胞因子(TGF-β、IL-10、PGE2、IDO)的分泌，改变抗原呈递(主要组织相容性复合体(MHC)I类的表达的部分或全部丧失)，中和分子的分泌，以及MICA和MICB表达，通过表达Fas-L，导致T淋巴细胞死亡的PD-L1，“反攻”细胞介导的免疫系统。在此阶段期间，破环的肿瘤细胞的数量与抗性细胞的数量均衡。此均衡阶段与在治疗期间观察到的缓解阶段对应，这也是通过毒性最强的克隆抵抗免疫防御系统或治疗的能力来选择毒性最强的克隆的选择阶段。在被称为逃逸阶段的第三阶段期间，已经发展一种或多种逃逸手段的抵抗免疫系统的各种保护机制的细胞在无任何控制下增殖。然后癌细胞发展为肿瘤块，这是生理逃逸现象的临床表现。在抵抗治疗的现象期间，在癌症的晚期和转移期也观察到相关的逃逸现象。

抗癌治疗包括外科手术，其中，目标主要是移除或减小肿瘤，但是这种“机械性”行为对致癌作用没有任何实际抑制效果并且通常通过旨在“消除”癌症起源的各种不同的治疗疗法来补充。在肿瘤细胞的情况下，放射疗法的目的是导致快速增殖细胞的DNA改变。放射疗法的副作用是双重的：甚至会照射健康细胞，从而引起健康细胞的破坏或能够导致其癌变的遗传变异，并且肿瘤细胞凭借产生伴侣蛋白或分子伴侣(HSP、GRP等)发展抗辐射诱导的细胞凋亡的抗性，从而引起逃逸现象。化学疗法旨在通过作用于细胞本身或通过抑制具体的代谢途径来消除肿瘤细胞：与DNA的直接相互作用(亲电子剂、嵌入剂、分裂剂)、与DNA的间接相互作用(DNA合成的抑制剂，例如，抗代谢物、拓扑异构酶抑制剂；纺锤体形成抑制剂)、新血管形成抑制剂、蛋白酶体抑制剂。肿瘤细胞在这里再次发展抵抗机制，并且尽管实施的多化疗策略，但伴随着大量肿瘤增殖、适应性的证据以及可以认为类似于自然逃逸现象的细胞选择，如免疫系统涉及的3E理论所述，观察到复发现象。