[发明专利]马齿苋中四种木脂素及其提取分离方法

权利要求书

1.一种从马齿苋药材中分离出的木脂素类化合物的提取分离方法，其特征在于，所述提取分离方法的具体步骤包括：

步骤1：取马齿苋干燥药材，采用乙醇提取，放凉至室温，得药液备用；

步骤2：将步骤1中药液蒸干后上硅胶柱，用乙酸乙酯洗脱，减压回收乙酸乙酯至浸膏，得到乙酸乙酯提取物；

步骤3：将步骤2中乙酸乙酯提取物经聚酰胺柱分离，采用乙醇-水梯度洗脱，乙醇蒸干后上硅胶柱，用乙酸乙酯，乙酸乙酯-甲醇洗脱，回收乙酸乙酯至浸膏，得到乙酸乙酯提取物；

步骤4：将步骤3中所得物经预处理的ODS柱层析分离，用甲醇-水梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层色谱进行检测，显色，将各显色的洗脱部位分别减压浓缩至干，得到浓缩物备用；

步骤5：将步骤4中所得物经HPLC分离制备，以乙腈-0.1%甲酸为流动相，检测波长为210nm和280nm，经薄层色谱进行检测，显色，最终得到所述的四种木脂素类化合物；

所述木脂素类化合物包括如下四种，其化学结构式如下：

分子式分别为C₁₈H₁₄O₆、C₁₉H₁₆O₇、C₁₈H₁₄O₆和C₁₈H₁₆O₄，并且根据结构命名为6,7-dihydroxy-4-(4''-hydroxy-3''-methoxyphenyl)-2-naphthoic acid（1）、6,7-dihydroxy-4-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-2-naphthoic acid（2）、4-(3,4-dihydroxyphenyl)-6-hydroxy-7-methoxy-2-naphthoic acid（3）和8-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-methoxynaphthalen-2-ol（4）：

。

2.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤1中乙醇回流提取两次，每次2小时，乙醇量为药材的8倍～16倍。

3.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤2中所用乙酸乙酯洗脱为等度洗脱。

4.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤3中用体积比为70∶30、95∶5的水和乙醇梯度洗脱；所用乙酸乙酯洗脱为等度洗脱，用体积比为5∶1、2∶1的乙酸乙酯和甲醇梯度洗脱。

5.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤4中用体积比为60∶40、70∶30、80∶20、90∶10的甲醇和水梯度洗脱。

6.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤4中所用的ODS柱的预处理过程为甲醇浸泡过24小时，上柱，用甲醇洗至滴入水中无混浊，再以初始流动相平衡。

7.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤5中以体积比分别为20∶80、19∶81、20∶80、40∶60的乙腈-0.1%甲酸为流动相等度洗脱，保留时间分别为11.27min得到化合物1、10.67min得到化合物2、11.63min得到化合物3、11.04min得到化合物4。