[发明专利]靶向CD123兔重组单克隆抗体的制备及应用

说明书

本发明涉及靶向CD123兔重组单克隆抗体的制备及应用，所得到的抗体具有良好的特异性，最重要的是该抗体亲和力高，能够识别天然细胞表面CD123蛋白，可用于流式及ELISA检测应用。

技术领域

本发明属于生物技术中的抗体制备领域，特别是涉及靶向CD123兔重组单克隆抗体的制备及应用。

背景技术

CD123是IL-3R的α亚基，其配体是IL-3，属于Ⅰ型单次跨膜蛋白，氨基酸全长378个氨基酸，胞外区有287个氨基酸，即19-305位氨基酸。研究表明，许多血液性肿瘤其CD123表达过量，特别是急性髓系白血病（AML）、急性B细胞型淋巴细胞白血病（B-ALLs）、多毛细胞白血病（Hairy Cell Leukemia）、母细胞性浆细胞树突细胞瘤（BPDCN）等。由于流式细胞术具有敏感、快速以及可定量等优势，目前临床上广泛被应用。而应用流式细胞术检测CD123则需要有靶向CD123的特异性良好的抗体。另外，急性髓系白血病患者初诊时CD123的表达量可以作为临床评估患者治疗反应和判断临床预后的参考依据。因此，开发靶向CD123的抗体，对比诊断和治疗应用具有重要的价值。

目前现有技术中，靶向CD123的抗体都是鼠源的。例如中国专利申请CN2020102295811公开了针对CD123的单克隆抗体就是以展示小鼠单链抗体的噬菌体库的方式生产的鼠源CD123单抗。虽然上述抗体也具有一定的应用前景，但是仍然需要开发亲和力更强、表位更多的单克隆抗体。

发明内容

本发明目的在于提供能靶向CD123兔重组单克隆抗体，选自以下兔重组单克隆抗体的一种或多种：

命名为1E4的兔重组单克隆抗体：其重链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；且轻链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:4，SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列；

命名为1E5的兔重组单克隆抗体：其重链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列，且轻链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列；

命名为1E6的兔重组单克隆抗体，其重链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别为SEQ IDNO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列，且轻链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列；

命名为5D3的兔重组单克隆抗体，其重链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别为SEQ IDNO:28、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:30所示的氨基酸序列，且轻链互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列；

在上述技术方案的基础上，命名为1E4的兔重组单克隆抗体，其重链可变区序列为SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列，且轻链可变区序列为SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列；

命名为1E5的兔重组单克隆抗体，其重链可变区序列为SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列，且轻链可变区序列为SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列；

命名为1E6的兔重组单克隆抗体，其重链可变区序列为SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列，且轻链可变区序列为SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列；

所述命名为5D3的兔重组单克隆抗体，其重链可变区序列为SEQ ID NO:34所示的氨基酸序列，且轻链可变区序列为SEQ ID NO:35所示的氨基酸序列；